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货号 | CS-C7837 | 货期 | 1~3天 |
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规格 | 50管/48样|100管/96样 | 英文名称 | Malondialdehyde (MDA) assay kit (TBA method) |
用途 | 仅供科研研究实验 |
商品属性:
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C7837 | 50管/48样|100管/96样 | 1~3天 | Malondialdehyde (MDA) assay kit (TBA method) |
商品介绍:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度,通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。
产品优点如下:
1、操作简便:可将试剂混合成单试剂操作,全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放12个月有效,试剂配制后至少能存放6个月;呈色稳定,
显色后24小时吸光度不变。
3、再现性好:批内CV=2.3%,批间CV=5.34%。
4、回收试验: X =101.8%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产等,效果均佳。
步骤和注意事项:
准备实验环境:确保实验区域清洁,使用酒精清洁计数板和盖玻片,然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养:
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗,并加入培养基中,摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中,定期更换培养液。
细胞冻存与复苏:
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程,原则是“慢冻快融",以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数:
制备细胞悬液,使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。
在显微镜下,用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数,细胞压中线时,只计左侧和上方者,不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用:
使用荧光染料对细胞进行染色,并观察细胞所发出的荧光信号,以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应(PCR):
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液,开始PCR反应。
PCR反应的成功与否,可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染:
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂,将DNA载体溶解于转染试剂中,与细胞混合均匀。
处理转染细胞,并进行下一步实验。
在操作过程中,应注意实验室安全规范,避免随意丢弃垃圾,及时登记购买耗材或试剂,保持实验环境的清洁和安全
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