当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>细胞生物学试剂>>免疫检测>> 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)免疫检测
货号 | CS-C8815 | 货期 | 1~3天 |
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规格 | 125ml | 英文名称 | Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2) |
用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)免疫检测抗原修复的方法非常多,主要有热诱导的抗原修复(Heat Induced Epitope Retrieval,HIER)和酶诱导的抗原修复(Proteolytic Induced Epitope Retrieval),修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步,抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液,从而达到佳的修复效果。
本品为柠檬酸钠-EDTA抗原修复缓冲液,pH 6.2,采用了常用的柠檬酸钠缓冲液和EDTA,结合了两者修复抗原的优点,并经过适当优化,可以更加有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。本品可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
本品为40×浓缩的柠檬酸钠-EDTA抗原修复液,使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位,导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复,也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下,可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3)本产品经冻存后需经适当加热后才能溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂,加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状,属于正常现象,并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后,例如1-2天,溶液会澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品,此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状,也属于正常现象,请放心使用。
4)修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来浸没组织切片。
储存条件:4℃,有效期一年。
产品名称 | 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×)免疫检测 | 货号 | CS-C8815 |
英文名称 | Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2) | 规格 | 125ml |
免疫染色实验,细胞或组织往往需要经多醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构,然而此步操作通常会封闭抗原决定簇,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,从而引起染色信号衰减,甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于:1)醛类固定剂导致组织上的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,从而封闭抗原表位;2)醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联(cross-link),形成醛交联蛋白,导致抗原表位被封闭。因此,需要对固定组织进行抗原修复(antigen retrieval,AR)来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。
注意事项:
1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。
2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。
3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法,实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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