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| 货号 | CS-C8955 | 货期 | 1～3天 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 80T|160T | 英文名称 | Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antib |
| 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品属性：
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C8955 | 80T|160T | 1～3天 | Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Goat |
商品介绍：
本试剂盒采用SABC系统，适于一抗为山羊来源的抗体。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物su分子有高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，等电点 pI=6.0~6.5，对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以SABC兼具高敏感性，低背景和操作简便等优点。采用方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用，而且非常稳定。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。兔血清封闭液 37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(山羊IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物su标记兔抗山羊IgG，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加 SABC，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色：镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。脱水，透明。
10. 选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
步骤和注意事项：
准备实验环境：确保实验区域清洁，使用酒精清洁计数板和盖玻片，然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养：
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗，并加入培养基中，摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，定期更换培养液。
细胞冻存与复苏：
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，原则是“慢冻快融"，以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数：
制备细胞悬液，使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。
在显微镜下，用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，只计左侧和上方者，不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用：
使用荧光染料对细胞进行染色，并观察细胞所发出的荧光信号，以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应（PCR）：
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液，开始PCR反应。
PCR反应的成功与否，可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染：
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂，将DNA载体溶解于转染试剂中，与细胞混合均匀。
处理转染细胞，并进行下一步实验。
在操作过程中，应注意实验室安全规范，避免随意丢弃垃圾，及时登记购买耗材或试剂，保持实验环境的清洁和安全
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