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货号 | CS-C8893 | 货期 | 1~3天 |
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规格 | 100ml | 英文名称 | RIPA Lysis Buffer For Western Blot |
用途 | 仅供科研研究实验 |
商品属性:
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C8893 | 100ml | 1~3天 | RIPA Lysis Buffer For Western Blot |
商品介绍:
对目的蛋白进行检测分析时,总蛋白的提取至关重要,如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液,才能大程度地保证后续实验的成功。而RIPA Lysis Buffer For Western Blot对动物组织和细胞的裂解能力,它可以裂解细胞核和线粒体,并可提取到更多的膜蛋白,从而可获得更多的总蛋白。因其强的裂解能力,使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来,使蛋白变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶(货号:MT0068)消化可有效解决。经我司RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度;使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。
RIPA裂解缓冲液(Western Blot)
产品特点:
1.可以很好的裂解细胞膜及细胞核,从而更好的释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白。
2.对于核蛋白,经本品裂解后,核蛋白与粘稠的基因组DNA分离,离心后核蛋白存在于上清中,核蛋白的捕获率高达90%。
3.对于膜蛋白,Western Blot RIPA Lysis Buffer可大程度的破坏细胞膜和变性蛋白,使蛋白与膜分离,防止蛋白与膜复合物在离心后沉淀,从而防止蛋白丢失。
4.在提取蛋白过程中,基因组DNA释放使得蛋白提取液变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。
储存条件:置于室温阴凉处,可保存2年。
步骤和注意事项:
准备实验环境:确保实验区域清洁,使用酒精清洁计数板和盖玻片,然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养:
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗,并加入培养基中,摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中,定期更换培养液。
细胞冻存与复苏:
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程,原则是“慢冻快融",以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数:
制备细胞悬液,使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。
在显微镜下,用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数,细胞压中线时,只计左侧和上方者,不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用:
使用荧光染料对细胞进行染色,并观察细胞所发出的荧光信号,以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应(PCR):
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液,开始PCR反应。
PCR反应的成功与否,可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染:
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂,将DNA载体溶解于转染试剂中,与细胞混合均匀。
处理转染细胞,并进行下一步实验。
在操作过程中,应注意实验室安全规范,避免随意丢弃垃圾,及时登记购买耗材或试剂,保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品:
BET抑制剂(GSK1324726A) | 血管紧张肽meiAELISA试剂盒 |
P450抑制剂(Clotrimazole) | Cereblon蛋白ELISA试剂盒 |
TLR 7激动剂(GS-9620) | 顺乌头(ACO)活性比色法检测试剂盒 |
CXCL8受体CXCR1/2变构抑制剂(Reparixin) | 天冬合成(AS)活性比色法检测试剂盒 |
β-内酰胺酶抑制剂(Tazobactam) | 滑行蛋白βELISA试剂盒 |
STAT抑制剂(Nifuroxazide) | 肌球蛋白ⅩⅨELISA试剂盒 |
RNA polymerase抑制剂(T 705) | 鸡mei(CA)试剂盒ELISA |
HIV非核苷逆转录酶抑制剂(Rilpivirine) | 人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)检测试剂盒elisa |
PknG抑制剂(AX20017) | 人脂联su受体2(ADIPOR2)检测试剂盒elisa |
DNA旋转酶抑制剂(Marbofloxacin) | 大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 |
锤头核酶抑制剂(Framycetin) | 鼻气管炎鸟杆菌PCR试剂盒 |
HBV抑制剂 | 唾液链球菌PCR试剂盒 |
HCV NS5B聚合酶抑制剂(VCH-916) | 狂犬病病毒街毒株PCR检测试剂盒 |
HIV-1与细胞CD4受体结合抑制剂(BMS-663068) | RIPA裂解缓冲液(Western Blot)免疫检测偶发分枝杆菌PCR检测试剂盒 |
HIV-1逆转录抑制剂(Trovirdine) | 费兰杜病毒RT-PCR试剂盒 |
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