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当前位置：上海莼试生物技术有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> Hoechst33258染色试剂盒细胞组织染色
| 货号 | CS-C6266 | 货期 | 1～3天 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 100T | 英文名称 | Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit |
| 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
细胞凋亡时产生显著的变化是染色体固缩，DNA 裂解使细胞核形态产发生变化。本试剂盒提供的荧光染料Hoechst 33258 是一种无毒、水溶性双苯咪唑类化合物，可作为荧光探针与DNA 分子结合。
商品属性：
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C6266 | 100T | 1～3天 | Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit |
在凋亡细胞中，细胞膜对Hoechst 33258 的摄取增高，并且由于染色体高度浓缩，Hoechst 33258 与之结合增强，染色呈强蓝色荧光，而正常细胞只呈微弱荧光，死细胞则不被染色，由此可检测出凋亡。
操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡；
2. 用冷Buffer A 洗涤细胞二次，离心收集106 细胞于1.5mL 微量离心管中；（贴壁细胞原位固定染色）
3. 加入1mL 的4%溶液(用户自备)，4℃固定细胞10min；
4. 离心去固定液，用Buffer A 洗两遍；离心后留50～100μL Buffer A 重悬细胞；
5. 取上步骤50～100μL 细胞悬液涂片，自然晾干；
6. 滴加100μL Hoechst 33258 工作液（备注1），室温染色10 min，水冲净晾干；
7. 以紫外光340nm 波长激发，荧光显微镜下观察。
储存：2-8℃，避光，有效期一年。
步骤和注意事项：
准备实验环境：确保实验区域清洁，使用酒精清洁计数板和盖玻片，然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养：
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗，并加入培养基中，摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，定期更换培养液。
细胞冻存与复苏：
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，原则是“慢冻快融"，以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数：
制备细胞悬液，使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。
在显微镜下，用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，只计左侧和上方者，不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用：
使用荧光染料对细胞进行染色，并观察细胞所发出的荧光信号，以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应（PCR）：
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液，开始PCR反应。
PCR反应的成功与否，可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染：
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂，将DNA载体溶解于转染试剂中，与细胞混合均匀。
处理转染细胞，并进行下一步实验。
在操作过程中，应注意实验室安全规范，避免随意丢弃垃圾，及时登记购买耗材或试剂，保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品：
尼氏小体染色液 | 色氨酰tRNA合成(WARS)ELISA试剂盒 |
MAP4K4抑制剂(PF-06260933) | 色氨羟化(TPH)ELISA试剂盒 |
IRAK4抑制剂（IRAK inhibitor 4 trans） | 前列腺F(PGF)ELISA试剂盒 |
MAGL抑制剂(KML29) | 三碘甲状腺原氨(T3)ELISA试剂盒 |
S1P1激动剂(AKP-11) | 腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒 |
TNF-α诱导抑制剂(Hispidol) | 腮腺炎病毒IgGELISA试剂盒 |
细胞因子释放抑制剂(AX-024) | 排序连接蛋白3(SNX3)ELISA试剂盒 |
COX抑制剂（Zaltoprofen） | 软骨寡聚蛋白(COMP)ELISA试剂盒 |
PDE4B抑制剂 | 黏多糖/糖胺聚糖ELISA试剂盒 |
血小板粘附抑制剂（Limaprost） | 乳腺癌标志物-CA153ELISA试剂盒 |
p38MAPK抑制剂(SD-06) | 末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 |
JAK3抑制剂（(3S,4S)-Tofacitinib） | 乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)ELISA试剂盒 |
COX-2抑制剂(Propyphenazone) | 乳头状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)ELISA试剂盒 |
组胺受体抑制剂（Levodropropizine） | Hoechst33258染色试剂盒细胞组织染色硫角质(KS)ELISA试剂盒 |
核苷类似物逆转录酶抑制剂 | 磷化蛋白激B(P-PKB)ELISA试剂盒 |
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