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| 货号 | CS-C6155 | 货期 | 1～3天 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 500T | 英文名称 | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit |
| 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE对细胞进行示踪及增殖检测的试剂盒，由CFDA,SE粉末、溶剂及相关细胞染色缓冲液组成，该试剂盒主要工作原理为：CFDA, SE具有细胞膜渗透性，本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后，可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可发强烈的绿色荧光，不能穿透细胞膜，能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上，同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内，被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数月，因此非常适用于细胞群落分析。
商品属性：
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C6155 | 500T | 1～3天 | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit |
CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一，优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1通道）根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次（1/2的荧光强度），二次（1/4的荧光强度），三次（1/8的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFSA，SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE于淋巴细胞的增殖检测，也可用于成纤维细胞，自然杀伤细胞，造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式细胞仪检测细胞增殖外，还可用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
本品包含配制CFDA，SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液，简化了实验前期准备工作。另，CFDA,SE标记细胞一般15min即可完成，对于不同细胞，需要自行摸索佳标记时间。按照每个样本的标记体积为2ml计算。
步骤和注意事项：
准备实验环境：确保实验区域清洁，使用酒精清洁计数板和盖玻片，然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养：
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗，并加入培养基中，摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，定期更换培养液。
细胞冻存与复苏：
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，原则是“慢冻快融"，以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数：
制备细胞悬液，使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。
在显微镜下，用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，只计左侧和上方者，不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用：
使用荧光染料对细胞进行染色，并观察细胞所发出的荧光信号，以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应（PCR）：
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液，开始PCR反应。
PCR反应的成功与否，可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染：
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂，将DNA载体溶解于转染试剂中，与细胞混合均匀。
处理转染细胞，并进行下一步实验。
在操作过程中，应注意实验室安全规范，避免随意丢弃垃圾，及时登记购买耗材或试剂，保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品：
AO-EB双染色试剂盒 | E 犬雌激ELISA检测试剂盒 |
Btk抑制剂（Btk inhibitor 1 R enantiomer hydrochloride） | PROG 犬孕激/孕酮ELISA检测试剂盒 |
U373MG细胞抑制剂(Ecteinascidin 770) | ICAM-2/CD12 兔子细胞间粘附分子2ELISA检测试剂盒 |
rmGlu1L757V谷氨抑制剂(DFMTI) | T4 犬甲状腺ELISA检测试剂盒 |
MK2激酶抑制剂（MK2-IN-1） | VE 犬维生EELISA检测试剂盒 |
SETD8抑制剂（UNC0379 trifluoroacetate） | VK1 犬维生K1ELISA检测试剂盒 |
p53与MDM2相互作用抑制剂 | Aβ1-4 兔β淀粉样蛋白1-4ELISA检测试剂盒 |
G12C变构抑制剂（6H05 trifluoroacetate） | MHC/DLA 犬主要组织相容性复合体ELISA检测试剂盒 |
Btk激酶抑制剂（Btk inhibitor 1 R enantiomer） | IL-1sR Ⅰ 兔子白介1可溶性受体I ELISA检测试剂盒 |
CYP17裂解酶抑制剂(VT-464 R enantiomer) | GABA 犬γ氨基丁ELISA检测试剂盒 |
微管抑制剂（MMAD hydrochloride） | ET-1 豚鼠内皮1ELISA检测试剂盒 |
APE-1抑制剂(Lucanthone) | PSA 犬前列腺特异性抗原ELISA检测试剂盒 |
ROCK抑制剂(ZINC00881524) | FA 犬叶ELISA检测试剂盒 |
Kit/PDGFRα和β抑制剂（Masitinib mesylate） | 细胞增殖与示踪检测试剂盒中期因子(MK)ELISA试剂盒 |
MMAD抑制剂(Vc-MMAD) | 再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA试剂盒 |
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