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XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂操作方法

1. 96 孔板加入细菌100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细菌培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及湿度的细菌培养箱中孵育适当时间。

4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。

5. 37℃下孵育1~4 小时。

6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。

XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，活细菌线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶，可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中，不形成颗粒，可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

细胞生物学研究的常用技术有哪些：

1.显微技术：包括显微观察,显微操作.

2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.

3.细胞工程：细胞培养。

注意事项：

1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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