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当前位置：上海莼试生物技术有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞凋亡与增殖>> 吖啶橙-EB双染色试剂盒细胞凋亡与增殖
| 货号 | CS-C6249 | 货期 | 1～3天 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 50ml*2|250ml*2 | 英文名称 | Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit |
| 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。
商品属性：
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C6249 | 50ml*2|250ml*2 | 1～3天 | Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit |
使用方法：(仅供参考)
使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用现配。
对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS;如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。
对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。
注意事项：
含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整，以期达到佳效果。
储存条件：4℃避光密封保存，有效期一年
步骤和注意事项：
准备实验环境：确保实验区域清洁，使用酒精清洁计数板和盖玻片，然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养：
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗，并加入培养基中，摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，定期更换培养液。
细胞冻存与复苏：
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，原则是“慢冻快融"，以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数：
制备细胞悬液，使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。
在显微镜下，用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，只计左侧和上方者，不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用：
使用荧光染料对细胞进行染色，并观察细胞所发出的荧光信号，以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应（PCR）：
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液，开始PCR反应。
PCR反应的成功与否，可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染：
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂，将DNA载体溶解于转染试剂中，与细胞混合均匀。
处理转染细胞，并进行下一步实验。
在操作过程中，应注意实验室安全规范，避免随意丢弃垃圾，及时登记购买耗材或试剂，保持实验环境的清洁和安全
下列是公司正在出售的产品：
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CDK2抑制剂(NU6300) | EBMZ 人抗表皮细胞基底膜抗体ELISA检测试剂盒 |
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葡萄糖转运1抑制剂(STF-31) | 吖啶橙-EB双染色试剂盒细胞凋亡与增殖Col Ⅲ 人Ⅲ型胶原ELISA检测试剂盒 |
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