RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)-上海莼试生物技术有限公司

规格	1×106cells/T25培养瓶	种属	小鼠
货号	CS-X2189	细胞形态	不规则形

产品信息：

货号	CS-X2189	种属	小鼠
生长特性	贴壁细胞，不用yi酶消化	细胞形态	不规则形
温度	液氮	培养条件:	气相：空气，95%；CO2，5%
鉴定	STR鉴定正确	生长培养基	DMEM＋10% FBS＋1% P/S

RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)

商品介绍：

产品名称：RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)
别称 RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7

种属小鼠

年龄（性别）雄性，成年

组织来源 Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；单核细胞；巨噬细胞

生长特性贴壁细胞，不用yi酶消化

细胞形态不规则形

背景描述 RAW 264.7细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤；sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW 264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒，XC斑点形成试验阴性。RAW 264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖，并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球，但对肿瘤靶细胞无作用。

生物安全等级 2

生长培养基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:6~1:8

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~12-30小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

受体表达情况 complement (C3)

抗原表达情况 H-2d

基因表达情况 lysozyme, H-2d; Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox).

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

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操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。