人表皮角质形成细胞-上海莼试生物技术有限公司

规格	5×105Cells/T25培养瓶	组织来源	皮肤组织
货号	CS-X3044	细胞形态	上皮细胞样

产品信息：

货号	CS-X3044	组织来源	皮肤组织
传代特性	可传1-2代	培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞形态	上皮细胞样	生长特性	贴壁
培养条件		换液频率	每2-3天换液一次

人表皮角质形成细胞

商品介绍：

产品名称：人表皮角质形成细胞
2.组织来源：皮肤组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

人表皮角质形成细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞，此类细胞为表皮的主体，由表皮深层始逐渐增殖、分化，并在成为角化的角质细胞中，细胞核与细胞器消失，细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用，故不必在洗擦身体时用力搓擦，使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层，在上皮程序性死亡后，细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化，不能充分增殖。角质形成细胞最终产生角质蛋白，在其向角质细胞演变过程中，一般可以分为四层，即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外，在某些部位，特别在掌跖部位，角质层下方还可见到透明层。

5.方法简介：

公司实验室分离的人表皮角质形成层细胞先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的人表皮角质形成细胞经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

人表皮角质形成细胞

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

公司正在出售的产品：

人小梁网细胞	人抗DNAmeiB抗体(anti-DNase B Ab)试剂盒ELISA
小鼠淋巴管内皮细胞	人可溶性腺苷suan环化mei(sAC)试剂盒ELISA
小鼠脑动脉血管平滑肌细胞	人核因子κB抑制物激meiα(IKK-α)ELISA检测试剂盒
小鼠膀胱移行上皮细胞	人CD6分子(CD6)检测试剂盒
小鼠脐带间充质干细胞	腺病毒E型PCR试剂盒
小鼠全骨髓细胞	马兜铃染料法PCR鉴定试剂盒
小鼠神经小胶质细胞	流行性乙型脑炎病毒PCR检测试剂盒
小鼠肾小球上皮细胞	猪水泡病病毒PCR检测试剂盒
小鼠视网膜神经节细胞	开心果源性成分PCR试剂盒
小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)	人免疫缺陷病毒II型B组前病毒PCR试剂盒
小鼠小肠血管内皮细胞	人乳头瘤病毒16PCR试剂盒
小鼠牙周膜成纤维细胞	口蹄疫病毒亚型PCR检测试剂盒
小鼠胸腺淋巴细胞	人表皮角质形成细胞空肠弯曲菌PCR检测试剂盒
小鼠阴道壁成纤维细胞	人疱疹病毒8型PCR试剂盒
小鼠直肠平滑肌细胞	脑膜炎奈瑟菌C群PCR检测试剂盒

操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。