大鼠小肠Cajal间质细胞-上海莼试生物技术有限公司

规格	5×105Cells/T25培养瓶	组织来源	小肠组织
货号	CS-X3249	细胞形态	成纤维细胞样

产品信息：

货号	CS-X3249	组织来源	小肠组织
传代特性	可传1-2代	培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞形态	成纤维细胞样	生长特性	贴壁
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%	换液频率	每2-3天换液一次

大鼠小肠Cajal间质细胞

商品介绍：

产品名称：大鼠小肠Cajal间质细胞
2.组织来源：小肠组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠小肠Cajal间质细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。Cajal间质细胞（ICC）是一类主要分布于胃肠道的间质细胞，是胃肠道的起搏细胞和信号传导细胞，与肌细胞以及末梢神经元有着紧密的关系，具有激发和促进胃肠蠕动的作用。借助于电子显微镜技术，清楚观察到了ICC位置分布和内部精细结构；应用免疫荧光等生化技术，发现了其特殊表达的c-kit蛋白；利用电生理技术，得知多种胃肠动力障碍疾病也与其异常有关。多年来，学者逐渐在胃肠道、胆道、膀胱、子宫等部位发现了ICC的踪迹，并试图阐述其与某些疾病的发生机制。

5.方法简介：

公司实验室分离的大鼠小肠Cajal间质细胞采用胶原酶消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的大鼠小肠Cajal间质细胞经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

大鼠小肠Cajal间质细胞

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

公司正在出售的产品：

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CAL 27 (人舌鳞癌细胞)	登革热病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR检测试剂盒
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CNE-2Z (人鼻咽癌细胞)	禽腱鞘炎病毒RT-PCR试剂盒
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操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。