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大鼠心脏干细胞

参  考  价:900 - 3800 /瓶
具体成交价以合同协议为准
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    上海市

更新时间:2024-07-26 13:23:13浏览次数:446次

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货号 CS-X3251 规格 5×105Cells/T25培养瓶
生长特性 贴壁 组织来源 心脏组织
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细胞保存方法:

(一)细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;

2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;

4. 离心1000rpm,5min;

5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;

6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;

8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。

产品信息:

货号

CS-X3251

组织来源

心脏组织

传代特性

可传3代左右

培养基

FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

细胞形态

长梭形

生长特性

贴壁

培养条件


换液频率

2-3天换液一次

商品介绍:

产品名称:大鼠心脏干细胞
2.组织来源:心脏组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠心脏干细胞分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。研究发现,心脏干细胞是一种多潜能细胞,具有再生和克隆能力,并可分化为心肌细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。体内研究显示,从心脏中分离出的心脏干细胞,经体外简单培养、增殖和标记后,移植到心肌梗死边缘区域,心梗血流动力学和心室壁厚度较对照组明显改善,心肌梗死边缘区域发现有标记的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞。尽管其新生心肌细胞较小,但表达一些特殊肌蛋白如心脏肌球蛋白重链、α-肌动蛋白、α-辅肌动蛋白、连接蛋白等,证实了心脏干细胞对心肌梗死的修复作用。干细胞移植治疗是目前心肌梗死和缺血性心脏病细胞重建的主要方法,成体干细胞中的c-kit阳性心脏干细胞因其来源于心脏,有定向心脏细胞系分化的趋势,体内外可以分化成心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞,同时自体移植不存在免疫排斥反应及伦理问题已经成为目前研究的热点。短期内获得治疗量的自体心脏干细胞是这一治疗应用于临床的关键所在。因此,研究一种新的分离培养方法可在短时期内获得大量纯度较高的自体c-kit阳性心脏干细胞成为目前干细胞领域研究的热点问题之一。

5.方法简介:

公司实验室分离的大鼠心脏干细胞采用机械剪碎组织、胶原酶分次消化法结合差速贴壁、心脏干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

公司实验室分离的大鼠心脏干细胞c-kit免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

包被条件 PLL(0.1mg/ml)

培养基 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

大鼠心脏干细胞

大鼠心脏干细胞



操作步骤:

1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。

2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。

3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。

注意事项:

1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。

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