小鼠羊膜上皮细胞-上海莼试生物技术有限公司

规格	5×105Cells/T25培养瓶	组织来源	胎盘组织
货号	CS-X3338	细胞形态	上皮细胞样

产品信息：

货号	CS-X3338	组织来源	胎盘组织
传代特性	可传1-2代	培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞形态	上皮细胞样	生长特性	贴壁
培养条件		换液频率	每2-3天换液一次

小鼠羊膜上皮细胞

商品介绍：

产品名称：小鼠羊膜上皮细胞
2.组织来源：胎盘组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠羊膜上皮细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜细胞主要由羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞组成，均具有多分化潜能，可转化为神经元，且还有合成、释放生物活性物质和神经营养因子的功能。

5.方法简介：

公司实验室分离的小鼠羊膜上皮细胞采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的小鼠羊膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

小鼠羊膜上皮细胞

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

公司正在出售的产品：

小鼠骨骼肌成纤维细胞	人蛋白 DJ-1(PARK7)ELISA检测试剂盒
CAL-62 (人甲状腺癌细胞	人上皮特异性抗原(ESA)检测试剂盒
Calu-1 (人肺癌细胞)	人半乳糖(Galactose)检测试剂盒
Calu-3 (人肺腺癌细胞(胸水))	人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)试剂盒 ELISA
Calu-6 (人退行性癌细胞)	三日疟原虫PCR试剂盒
Caov-3 (人乳突状卵巢腺癌细胞)	质型多角体病毒PCR检测试剂盒
CATH.a(小鼠神经细胞)	A 族链球菌(GAS)核suan检测试剂盒
CCC-SMC-1 (兔主动脉平滑肌细胞)	口蹄疫病毒基因分型PCR检测试剂盒
CCD-1095Sk (人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞)	猫杯状病毒RT-PCR试剂盒
CCD-18Co (人结肠组织细胞)	葡萄状穗霉属通用PCR试剂盒
CCRF-CEM [CCRF CEM] (人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞)	平尾毛细线虫PCR检测试剂盒
CFPAC-1 (人胰腺癌细胞)	猫衣原体PCR试剂盒
CEM/C1 (人急性淋巴细胞白血病细胞)	小鼠羊膜上皮细胞猫杯状病毒（FCV）PCR检测试剂盒（荧光-PCR法）
Chang liver (人张氏肝细胞)	佩氏着色霉PCR检测试剂盒
CHL (仓鼠肺细胞)	布尼亚病毒（BV）核suan检测试剂盒

操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。