大鼠棕色前脂肪细胞 返回列表页

大鼠棕色前脂肪细胞

2.组织来源：脂肪组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠棕色前脂肪细胞分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞：一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞；另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪细胞呈圆形，已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞，与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞，在演变的过程中不断吸收脂质，终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强，可望成为软组织缺损的有益填充物。

5.方法简介：

公司实验室分离的大鼠棕色前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的大鼠棕色前脂肪细胞经油红O染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

1、收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2、加入0.25％（w / v）0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3、将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：

1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.

2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

注意事项：

1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2、收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

操作步骤：

步骤1：从冰箱拿出无血清非程序冻存液，待用

步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）

步骤3：弃上清，加入适量无血清非程序冻存液，重悬细胞

步骤4：按照1~1.5mL/管的量分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记

步骤5：将冻存管直接移入-80℃冰箱中，24h后转移至液氮长期保存

在没有冻存盒或者非程序冻存液时，可以选择手动梯度降温。但手动梯度降温不适用于所有细胞，且效果不稳定，同样需要先做冻存测试。

公司正在出售的产品：

大鼠气管软骨细胞

EJ-1 (人膀胱癌细胞) (T24污染细胞系，暂不供应)

EL4 (小鼠淋巴瘤细胞)

EMT6 [EMT-6] (小鼠乳腺癌细胞)

ES-2 (人卵巢透明细胞癌细胞)

F81 (猫肾细胞)

F9 (小鼠畸胎瘤细胞/小鼠胚胎癌细胞)

FaDu (人咽鳞癌细胞)

Farage (人B淋巴瘤细胞)

FC33 (人胚胎肾细胞(Asp-2基因修饰))

FHs 74 Int (人小肠上皮细胞)

FO (小鼠骨髓瘤细胞)

FTC-133 (人滤泡状甲状腺癌细胞)

G1 (发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞)

G-401 (人肾癌Wilms细胞)

人转运体样蛋白4(SLC44A4)检测试剂盒

人抗着丝点抗体(ACA/CENP)检测试剂盒

人白细胞酯mei(LE)试剂盒ELISA

人β内啡肽(β-EP)ELISA检测试剂盒

牛瘟病毒PCR试剂盒

登革病毒1型PCR检测试剂盒

肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核suan检测试剂盒

蜡样芽孢杆菌sleL基因(110bp)常规PCR检测试剂盒

猫附红细胞体（猫嗜血支原体）PCR试剂盒

葡萄球菌属通用PCR试剂盒

皮炎芽生菌PCR检测试剂盒

大鼠棕色前脂肪细胞毛滴虫PCR检测试剂盒

猫传染性腹膜炎病毒PCR试剂盒

派琴虫通用PCR试剂盒

羊源性成分(Ovine)核suan检测试剂盒