P19-CAG-tTA-1F3细胞保存几大步骤

　　1. P19-CAG-tTA-1F3细胞液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？

　　要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

　　2.P19-CAG-tTA-1F3细胞 液体培养基中的作用，及使用方法。

　　新wen速递：让细胞“百毒不侵”,人类基因组编写计划转向设计“超安全”细胞。早在2016年，美国纽约大学的杰夫·博伊科、哈佛大学的乔治·邱奇、耶鲁大学生物工程师法瑞恩·艾萨克等的科学家在美国《科学》杂志上刊文宣布，将筹资1亿美元，启动历时10年的人类基因组编写计划（GP-write），从头开始在实验室中合成出人类基因组。消息一经发布，就引发了科学界和公众对于实验室“合成”出人类的强烈担忧。但在历时两年的喧哗与sao动后，该项目小组5月1日在波士顿宣布，将暂时放弃从头制造人类基因组的尝试，专注于编辑细胞以对抗病毒感染。
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　　几乎所有的细胞对有较高的要求，细胞需要合成蛋白质，在缺少时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的。在溶液中很不稳定，应置-20 ?C冰冻保存，用前加入培养基中。加有的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度（100倍）的溶液（1ml/支）。每支1ml的加到99ml*培养基中，其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色，-24?C保存。

　　3. P19-CAG-tTA-1F3细胞 培养用液pH对细胞生长的影响

　　由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。

　　但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

　　4.P19-CAG-tTA-1F3细胞 细胞传代消化时所用浓度越高越好吗？

　　不见得！因为溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为：

　　（1）０.０５％＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25%

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

　　多数细胞传代消化可使用０.０５％＋０.０２％ＥＤＴＡ这种消化液。　

　　（编辑：tanxi）