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本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)水平。用纯化的猪髓鞘碱性蛋白 (MBP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入髓鞘碱性蛋白(MBP),再与HRP 标记的髓鞘碱性蛋白 (MBP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的髓鞘碱性蛋白(MBP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪髓鞘碱性蛋白 (MBP)浓度。
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(4800pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
2400pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
1200pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
600pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
300pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
150pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
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