本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠*(GTH)水平。用纯化的小鼠*(GTH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入*(GTH),再与HRP 标记的*(GTH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的*(GTH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠*(GTH)浓度。
4 样品稀释液 3ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 3ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
160ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
80ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
40ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
20ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
10ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
4. 配液:将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止后15 分钟以内进行。
计算以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
2.有效期:6 个月
上海沪宇生物科技有限公司经营的ELISA试剂盒主要是进口原装的试剂盒,种类齐全,价格实惠,在我公司购买产品,方可免费实验代测。试剂盒主要是48人份和96人份,关于试剂盒的其他信息可以来电索要说明书,或者在线咨询销售人员。
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