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用ELISA法检测抗体滴度,怎样包被抗原到96孔板上啊?

时间:2014-12-25阅读:672
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ELISA法检测抗体滴度,在设置好,阳性孔,阴性孔的同时,包被好同等浓度的抗原,洗板;然后,将抗体倍比稀释,例如:在*孔到第十二孔,各加100微升的抗体稀释液,然后,在*孔加100微升抗体,混匀,抽出100微升加到第二孔,混匀,抽出100微升加到第三孔,混匀,依次一直加到第十二孔,混匀抽出100微升弃之。这样*到第十二孔中都是100微升的液体;并且依次的抗体稀释度为1:2,1:4,1:8......1:4096;当然,这个稀释过程可以在稀释板上进行。然后按照ELISA步骤,包被抗原,洗板,一抗,洗板,二抗,洗板,显色,终止,全过程后。来判定,你的抗体滴度。其中一抗就是你的待检抗体。

0.05mol/L pH9.6的碳酸盐缓冲液稀释抗原,按照每孔100uL的量加入到酶标板上,37度温育3小时或者4度过夜后用洗液洗板,在加入封闭液温育1小时,zui后拍干.

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