上海沪宇生物科技有限公司

酶联免疫试剂盒步骤

时间:2015-1-22阅读:324
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酶联免疫试剂盒操作步骤
1 确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。
2 将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。
3 酶标板加上盖,37℃反应90分钟。
4 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。
5 将准备好的*抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
6 0.01M TBS0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。
7 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。
8 0.01M TBS0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。
9 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见标准品的前3-4孔有    明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应zui长不要超过30分钟)。
10 用酶标仪在450nm测定O.D.值。
11 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N

Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验分析方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素, 已广泛应用在免疫学科研实验的各领域中。 本司产品仅供科研研究使用,不得用于其他用途! 


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