大肠菌群显色培养基

时间：2012-2-20阅读：2019

大肠菌群显色培养基
Coliform Chromogenic Medium

用途：用于快速、准确检测大肠菌群，培养24小时，大肠菌群显蓝绿色肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。

成份 (g/L)

特殊营养物质	47.55
显色剂	0.35
琼脂	13.0
pH 7.0-7.2 25 ℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。

注意

此培养基仅供实验室使用。

用法

称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶， 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心，倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ，混匀，凝固后， 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ～ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时，倾入无菌平皿，琼脂*凝固后，在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时，加入适当稀释度的样品液 1ml ，涂布于培养基上， 36 ± 1 ℃培养 18 ～ 24h 。

贮存

制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度 2-8 ℃，注意避光保存。

失效

干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

操作步骤

1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液

2 、取样品液 1ml 加入冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或涂布于平板上

3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h ，选用有 30 ～ 200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。

总大肠菌群 = 蓝绿色菌落

4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上， 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。

质量控制

1 、外观

此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。

2 、微生物试验

在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h 小时：

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
单增李氏菌	27853	-/+	无色
*	25923	-/+	无色
大肠杆菌	25922	+++	蓝色
沙门氏菌	+++	无色
大肠菌群	+++	蓝色

方法的局限性

本培养基鉴定大肠菌群，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。

典型特征

大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。

参考文献

• FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).

• KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).

LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).

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