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北京博镁基业科学仪器技术有限公司
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大分子量* 纯化至多50 μg BAC、PAC和P1 DNA或至多200 μg的柯斯质粒DNA和非基因组DNA
高效去除基因组DNA污染
转染级别纯度的高分子量DNA
快速简单的操作
中文名:大分子量* (10)
品 牌:QIAGEN
货 号:12462
纯化至多50 μg BAC、PAC和P1 DNA或至多200 μg的柯斯质粒DNA和非基因组DNA
高效去除基因组DNA污染
转染级别纯度的高分子量DNA
快速简单的操作
QIAGEN Large-Construct Kit提供重力流和阴离子交换柱,用于纯化大分子量的DNA。*的ATP-dependent外切酶消化步骤,确保特异性去除基因组DNA。产物DNA的纯度相当于经过两次CsCl密度梯度离心得到的纯度,适用于转染级别的应用。
特点 | 参数 |
应用 | Subcloning, transfection, sequencing etc. |
起始样本体积 | <500 ml culture volume |
质粒类型 | BAC, PAC, P1, cosmid DNA |
处理 | Manual (centrifugation) |
每次处理样本量;通量 | 1 sample per run |
技术 | Anion-exchange technology |
每次运行时间或处理样本数 | 280 min |
产量 | <150 ug |
性能
使用QIAGEN Large-Construct Kit纯化DNA,无基因组DNA的污染(参见Efficient removal of genomic DNA)。基因组DNA的去除确保准确可靠的进行DNA定量,使一些敏感实验可在明确的和可重复的条件下进行。
大分子量*原理
QIAGEN Large-Construct Kit使用经优化的重力流操作,获得的DNA的纯度显著高于其他常规方法获得的DNA的纯度。*的ATP-dependent外切酶消化步骤,确保特异性去除基因组DNA。
QIAGEN Large-Construct Kit含有的QIAGEN-tips中*的阴离子交换树脂专为核酸纯化设计。其出色的核酸分离特性可纯化得到高纯度DNA,相当于经过两次氯化铯梯度离心得到的纯度。预装的QIAGEN-tips(参见Anion-exchange tips)运用重力沉降原理,减少了质粒制备过程所需的手工操作时间。整个QIAGEN质粒纯化系统不使用*、、溴乙锭和氯化铯等有毒物质,zui大程度减小了对使用者及环境的危害。
操作流程
使用碱裂解法裂解多达500 ml的培养液后(参见QIAGEN Plasmid Kit procedures),使用试剂盒中的ATP-dependent外切酶进行消化,确保特异性去除基因组DNA及缺损的高分子量DNA。之后将样本上样至阴离子交换柱,在适当的低盐浓度和pH值条件下,质粒DNA与树脂特异性结合。用中等盐浓度的缓冲液洗涤,去除RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子的杂质。用高盐缓冲液洗脱已去除基因组DNA的纯化质粒DNA。加入异丙醇使DNA浓缩和脱盐,之后离心收集。
应用
QIAGEN Large-Construct Kit纯化获得的DNA适用于各种下游应用,包括:
亚克隆和制备DNA文库
对高分子量DNA直接进行测序
转染
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