人钙卫蛋白（Calprotectin）ELISA试剂盒说明书

人钙卫蛋白(Calprotectin)ELISA试剂盒说明书

产品规格：96T（人份）/48T（人份）
英文名称： Human calprotein  ELISA  KIT

 货号：ZK-H1478
品牌：子科生物ZIKER,美国R&D,美国SIGMA，美国sciencell
适用范围：实验结果仅供科研参考，不能用于临床诊断检测用。

实验说明：
1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

实验测定具体步骤：
1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。 
2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。 
3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。 
4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。 
5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。 
7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。 
11．用酶标仪在 450nm 测定 OD值。

ELISA试剂盒操作过程主要步骤总结如下：
稀释--加样--温育--配液--洗涤--加酶--温育--洗涤--显色--终止--测定

详细试剂盒检测范围和说明书见说明书！