人维生素C(VC)ELISA检测试剂盒子科生物研发生产,深圳子科生物ELISA试剂盒优质供应商,拥有10年的研发和生产经验,拥有*的仪器设备,专业的技术人员和*的实验技术,目前已经建立强大的实验技术服务平台,品牌设立为:ZIKER 。
[产品名称]人维生素C(VC)ELISA检测试剂盒[英文名称]Human Vitamin C,VC ELISA Kit[货号]ZK-H144[试剂盒]保存条件、保质期2-8℃低温保存下,6个月的保质期。
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深圳子科生物所有ELISA试剂盒均需要经过质检合格后才允许出库,能有效控制产品质量,广大客户可以放心购买。且子科生物所有ELISA试剂盒里的抗体均采用进口品牌抗体,能有效保证产品的高效灵敏性,且我公司研发人员有丰富的研发经验,*的仪器设备,*的实验技术,让我公司产品优于同等厂家系列产品,是您的*厂家。
人维生素C(VC)ELISA检测试剂盒实验测定具体步骤:
1.确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目,并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9;做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。
2.将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清,直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。
3.酶标板加上盖,37℃反应 90 分钟。
4.反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。 不洗。
5.将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白显色孔除 外)。37℃反应 60 分钟。
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次,每次浸泡 1 分钟左右。
7.将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白显色孔除外)。37℃反应 30 分钟。
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次,每次浸泡 1-2 分钟左右。
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液,37℃避光反应 20-25 分钟 (注意:显色时间供参考,因用户实验室条件差异,显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色,后 3-4 孔差别不明显)。
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液,此时蓝色立转黄色。
11.用酶标仪在 450nm 测定 O.D.值。
结果判定:
子科生物所供ELISA试剂盒结果判定一般分定性测定和定量测定两种:
1、定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的zui高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
2、定量测定
ELSIA操作步骤复杂,影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的*,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线zui高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是的检测区域。
测定小分子量物质常用竞争其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线示例见图注意图中横坐标为对数关系,这更有利于测定系统的表达。
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