人合胞病毒（RSV）IGMELISA检测试剂盒 返回列表页

?产品名称：人合胞病毒（RSV）IGMELISA检测试剂盒
?英文名称：Human RSV IGM  ELISA  KIT
?产品规格：96T（人份）/48T（人份）（单孔检测分别可以检测90份样本，42分样本，一般都需要留6个孔做标准曲线）。
?检测方法：酶联免疫分析ELISA方法
?有效期： 4 个月(4℃)；8 个月（-20℃）。 
?保存方法： 2-8℃（频繁使用时）; -20℃（长时间不用时）。 
?品牌：子科生物ZIKER,美国R&D,美国immonoway,美国sciencell,德国IBL
?质量保证：我告诉所有产品均需要经过质检通过后，才允许出库！
?适用范围：实验结果仅供科研参考，不推荐用于临床诊断结果。
?ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA产品主要用双抗体夹心法。
?标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
?产品性能：灵敏度高，特异性强，重复性。
?产品包装：盒（KIT）（含试剂+酶联板+覆膜等）

人合胞病毒（RSV）IGMELISA检测试剂盒实验测定具体步骤：
1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。 
2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。 
3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。 
4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。 
5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。 
7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。 
11．用酶标仪在 450nm 测定 OD值。

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。  
下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法
1 、选择试剂
选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 、加样 
可能原因： 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多时，请分批操作。
3 、孵育 
可能原因： 1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
解决办法： 1) 贴封片或加盖； 2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 、洗板 
可能原因： 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 
解决办法： 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5 、显色 
可能原因： 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。
解决办法： 1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 3) A、B液应避免接触金属器械。
6 、终止 
可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 、读板 
如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。深圳子科生物已经用于9年的技术研发经验，能极大的保障每个消费者的售后技术服务，让您买的放心，用的放心！

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