人血管抑素结合蛋白（AMOT）ELISA检测试剂盒 返回列表页

［产品名称］人血管抑素结合蛋白(AMOT)ELISA检测试剂盒
［英文名称］human Angiomotin (AMOT) ELISA Kit
［货号］ZK-H3015
［试剂盒］保存条件、保质期2-8℃低温保存下，6个月的保质期。
［运输方式］当地客户可以由专门配送人员免费送货上门货快递，外地客户当天下单当天免费快递送货上门。
［技术服务］凡购买子科生物子科生物任何一款ELISA酶联免疫分析检测试剂盒，都可以享受免费代测服务，外地客户可以由技术老师的指导下正确放置好样本的保存方式后快递邮寄到我公司技术部，本地客户可以享受免费上门取样服务！

深圳子科生物提供的ELISA试剂盒产品经过实验技术人员多年的研发经验积累可以检测多种标本，参数指标齐全，并可提供准确的数据分析，我公司并代理各大进口原装试剂盒，提供品牌有：美国RD、RB、 TSZ、Cloud-clone corp、MP、 Sciencell、Immonoway、ABI，IBL等等，并提供分子生物学检测试剂盒、免疫学检测试剂盒、金标法检测试剂盒、各品牌*抗体抗原、标准对照品、细胞菌株、生物培养基、生化试剂、实验耗材等等多门类上万种科研产品，欢迎您！

人血管抑素结合蛋白(AMOT)ELISA检测试剂盒实验测定具体步骤：
1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。 
2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。 
3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。 
4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。 
5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。 
7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。 
11．用酶标仪在 450nm 测定 OD值。

有两种设定空白对照的方案： 
（1）将 TMB 空白显色孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去 TMB 空白显色孔的 吸 光 值 后 ， 在 坐 标 纸 上 画 出 曲 线 ， 以 吸 光 值 作 为 纵 坐 标 ， 以 浓 度 作 为 横 坐 标 。 
（2）将零孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后，得到的数据可以 直接在坐标纸上画出曲线。 

人血管抑素结合蛋白(AMOT)ELISA检测试剂盒样品稀释的一般原则 
用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度 处于 ELISA 试剂盒的检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同，分别采取不同的稀释方案：
高：指待测因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀释。297μ ι 样品稀释液加 3μ ι 样品。 
中：指待测因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀释。225μ ι 样品稀释液加 25μ ι 样品。 
低：指待测因子在 31.2→2000pg/ml。按 1：2 稀释。100μ ι 样品稀释液加 100μ ι 样品。 
特低：指待测因子≤31.2pg/ml。样品一般不做稀释，按每孔 100μ ι 样品直接加入。

以上方案仅供参考，样品的稀释应有详细记录。

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