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黄曲霉毒素(AFT)ELISA试剂盒?产品规格:96T(人份)/48T(人份)(单孔检测分别可以检测90份样本,42分样本,一般都需要留6个孔做标准曲线)。
?检测方法:酶联免疫分析ELISA方法
?有效期: 4 个月(4℃);8 个月(-20℃)。
?保存方法: 2-8℃(频繁使用时); -20℃(长时间不用时)。
黄曲霉毒素(AFT)ELISA试剂盒的基本原理
就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应,并通过酶催化底物发生化学变化将抗原抗体反应通过颜色的形式显现出来。
(1)将抗原抗体反应固相化:即试验中的包被环节,使抗原或抗体吸附于固相载体表面。其机制可能是聚苯乙烯表面间的疏水基团可以无选择性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破坏蛋白分子结构,保持其生物学特性和免疫学活性;
(2)封闭:固相吸附蛋白是非特异性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,为了保障抗原抗体反应的特异性,因此,包被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭。一般认为牛血清白蛋白是zui为理想的封闭剂,也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清替代。
(3)抗原抗体反应:抗原或抗体在适当的介质下可进行特异的抗原抗体反应。 (4)酶反应:酶可以通过共价键与抗原或抗体连接形成结合物,当抗原抗体反应的时候,被检测靶目标中也结合了酶分子。
(5)ELISA试剂盒底物反应:结合在抗原抗体中的酶分子,可以促使底物发生颜色反应,检测人员可以裸眼观察,可以通过颜色来判定是否有免疫反应的存在,通过颜色的深浅判断标本中相应抗原或抗体的含量,也可借用酶标仪在适当的波长读取吸光度值。
实验所涉及到的仪器如下:
1、酶 标 仪
酶标比色仪介绍:
酶标比色仪简称酶标仪,通常指于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同,各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有:测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.001,准确性为lusm1%,重复性达0.5%。举例说,若某孔测得的A值为1.083,则该孔相对于空气的真实A值应为1.083lusm0.01(1.073~1.093),复测定数次,其A值均应1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000,新型号的酶标仪上限拓宽达2.900,甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同,线性范围常小于可测范围,比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900,而其线性范围仅0.000~2.000,这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下,操作时室温宜在15~30℃,使用前先预热仪器15-30分钟,测读结果更稳定。
测读A值时,要选用产物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读,即每孔先后测读两次,*次在zui适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不移动ELISA板的位置。例如OPD用492nm为W1,630nm为W2,zui终测得的A值为两者之差(W1-W2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。各种酶标仪性能有所不同,使用中应参考对应仪器说明书。
2、洗 板 机
3、离 心 机
4、培 养 箱
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