牛病毒性腹泻抗原(BVDAg)ELISA试剂盒子科生物研发生产,深圳子科生物ELISA试剂盒优质供应商,拥有10年的研发和生产经验,拥有*的仪器设备,专业的技术人员和*的实验技术,目前已经建立强大的实验技术服务平台,品牌设立为:ZIKER 。
牛病毒性腹泻抗原(BVDAg)ELISA试剂盒?产品规格:96T(人份)/48T(人份)
单孔检测:96T,可以检测90份样本,留5个孔做标准曲线,一个孔做空白对照;
48T,可以检测42份样本,留5个孔做标准曲线,一个孔做空白对照;
?产品包装:盒(KIT)(含试剂+酶联板+覆膜等)
?适用范围:实验结果仅供科研参考,不推荐用于临床诊断结果。
?有效期: 4 个月(4℃);8 个月(-20℃)。
可用作牛病毒性腹泻抗原(BVDAg)ELISA试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 细胞培养上清、细胞、组织等均可作标本以测定其中某种成份。有些标本可直接进行测定,有些 则需经预处理。
● 血清:
室温血液自然凝固 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,应再次离心。
● 血浆:
应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入 10 %( v/v )抗凝剂 ( 0.1M 柠檬酸钠或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右 ( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形 成,应再次离心。
●尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成, 应再次离心。
●细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集 上清。检测细胞内的 成份时,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
●细胞:
检测细胞的成份时,对于贴壁细胞,去除培养液,用PBS、理盐水或无血清培养液洗一遍。加 入适量裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞10 秒后,细胞 就会被裂解。对于悬浮细胞,离心收集细胞,用PBS、理盐水或无血清培养液洗一遍.加入适 量裂解液, 用枪吹打把细胞吹散。用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉 淀。如果细胞量较多,必需分装然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g离心3-5 分钟,取上 清,即可进行后续操作。
●组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS 或组织蛋白萃取试剂,缓冲液中可加入蛋白酶抑制 剂。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
实验操作注意事项
☆试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
☆加样:加样时,要控制加样速度,避免*孔与zui后一孔之见的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性;一般加样时间控制在10分钟内,如果样本数量过多,可使用多道移液器。
☆孵育:样品要在密闭的容器内进行孵育,严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
☆洗涤:洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,同时要消除板底残留的液体和手指痕迹,避免影响zui后的酶标仪读数。
☆反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,10分钟左右),如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
☆建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
☆建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
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