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亚铁血红素测试盒 (DIHM-250)

时间:2016/11/19阅读:574
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产品说明

亚铁血红素是卟啉家族中的重要成员,既可用来合成线粒体和细胞质, 也是血红蛋白、细胞色素、过氧化氢酶和过氧化物酶等蛋白质的关键辅基。亚铁血红素被广泛的应用于各种血液疾病的检测中。

 

在科研和药物研发中,方便、直接、自动化的亚铁血红素浓度检测手段是zui为理想的。本公司研制的亚铁血红素检测试剂盒是基于改良的曲通碱性溶液法。通过这种方法,亚铁血红素可被转化为有色物质,在波长为400 nm下检测,其颜色深浅程度与亚铁血红素的含量成正比。通过配方的改良,充分减小了未处理的样品中其他杂质的干扰,同时也提高了灵敏度。

 

产品用途

1.直接检测血清、血浆、尿液和亚铁血红素酶中的亚铁血红素含量。

 

2.适用于药理学研究,检测药物对亚铁血红素代谢的影响。

 

3.适用于新药开发,高通量筛选影响亚铁血红素含量的药物。

 

产品特点

敏、准确:在96孔板中测试,亚铁血红素的线性测试范围在0.6 μM 到125 μM之间。

 

简单、高通量:整个测试过程只需加入一种工作试剂并读取吸光度。利用96孔板的高通量检测手段,每天可以测试上千份样本。

 

安全:试剂无毒性。

 

多功能性:检测可以在96孔板或比色皿中进行。

 

试剂盒规格(采用96孔板可测试250份样本)

   试剂:50 mL

   校准液:10 mL(相当于62.5 μM 亚铁血红素)

 

储藏条件:可在室温下运输。试剂在4°C环境下保存

 

预防措施:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。

 

96孔板测试步骤

1. 空白对照和校准品:取透明平底96孔板,将50 μL的水(空白对照)和50 μL的校准品放入不同孔中,并在其中各加200 μL水,稀释的校准品相当于62.5 μM亚铁血红素

 

2. 样品血清和血浆样品可以直接用于检测(n = 1),全血液样品应先用蒸馏水稀释100倍(n = 100), 搅荡, 在1,4000 rpm 下离心5 分钟,取上清夜测定

将50 μL样品放入孔中 (注意:在吸取时避免气泡产生)。在样品孔中加入200 μL试剂,轻敲使其混合。

 

3.室温下反应5分钟,在400nm处(波长范围 380-420nm读取吸光度。

 

 

 

比色皿测试步骤

1.将100 μL样本和1000μL的试剂放入比色皿中,轻敲使其混合,在400nm的波长下读取吸光度。

 

2.在比色皿中加入100μL校准品和1000μL水。在400nm的波长下读取吸光度。

 

浓度计算

样本中亚铁血红素的浓度计算如下:

    

OD样本, OD校准品和 OD空白分别是样本、校准品和空白对照的吸光度。n 是稀释因数(血液样本的稀释因数是100)。

单位换算:  1 mg/dL 的亚铁血红素相当于15.3 μM0.001%  10 ppm

 

实验必需品(未提供)

吸液用仪器及其附件。采用96孔板测试:透明平底96孔板、微孔板分析仪采用比色皿测试:比色皿、分光光度仪

 

     

       96孔板测试标准曲线

 

论文发表

[1]. Mingone, C.J. et al (2006).  Protoporphyrin IX generation from delta-aminolevulinic acid elicits pulmonary artery relaxation and soluble guanylate cyclase activation. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 291: L337–L344.

 

[2]. Pamplona, A. et al (2007). Heme oxygenase-1 and carbon monoxide suppress the pathogenesis of experimental cerebral malaria. Nature Med. 13(6): 703-710.

 

[3]. Raghuram, S. et al (2007). Identification of heme as the ligand for the orphan nuclear receptors REV-ERBb and REV-ERBb. Nat Struct Mol Biol. 14(12):1207-13.

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