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质谱级蛋白酶

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更新时间：2023-08-08 13:03:42浏览次数：79次

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产品简介

质谱级蛋白酶

详细介绍

• 出色的选择性—具有 >95% 的 C 端赖氨酸和特异性；LysC 具有 >90% 的 C 端赖氨酸切割特异性
• 高纯度—未检测到活性（）
• 酶切—/LysC 酶组合可减少缺失切割
• 增强稳定性—经过化学修饰可降低自溶活性
• 便利—酶以稳定的冻干或液体形式提供

是一种源自猪胰腺提取物的质谱 (MS) 级蛋白酶，特异性切割赖氨酸和残基的羧基侧。该酶经过 TPCK 处理消除了活性，并通过甲基化进行化学修饰，得到高活性和更稳定的酶形式。可耐受常用的部分变性条件，如 0.1 SDS、1 M 尿素和 10% 乙腈。Pierce 在 pH 7-9 范围内活性较佳，在 pH < 4="" 条件下可逆失活。以="" 1="" mg、5="" 包="" 20="" µg="" 或="" 100="" µg="" 的冻干粉和="" 100="" µg="">

Lys-C 蛋白酶是从产酶溶杆菌中分离获得的质谱 (MS) 级蛋白酶。Lys-C 蛋白酶对赖氨酸残基具有较高的活性和特异性，与（即较少的肽段）相比，肽段较大，样品的复杂性较低。与不同，Lys-C 蛋白酶可以先切割赖氨酸然后切割，这使其适用于序列蛋白酶切，然后进行酶切，以减少切割缺失。这些的 Lys-C 蛋白酶特性可确保单独使用或随后进行酶切时的高酶切效率。此外，Lys-C 原型肽通常具有较高的电荷状态，使其成为 ETD 片段化的酶。

Lys-C 通常用于磷酸肽富集工作流程中，因为可在 N 和 C 端生成带有伯胺的肽，可利用胺反应性同量异位标签对片段进行双标记。这导致肽电离增强和定量限提高，因为在 MS3 采集期间可重新分离更多碎片离子。该酶可用于溶液内或胶内酶切工作流程，以产生用于 LC-MS/MS 蛋白鉴别的肽。

在 37°C 下可在 2 小时内完成高效蛋白酶切。在高度变性条件下（如 8 M 尿素、2 M 盐酸胍、1% SDS、2% CHAPS 和 40% 乙腈），Lys-C 蛋白酶可保持活性，并在 pH 7–9 条件下充分发挥作用（pH 8 下活性）。该冻干酶的质量为 30 kDa，在 –20°C 下储存时可保持稳定 1 年。该 Lys-C 酶以冻干形式（20 µg 或 100 µg含量）包装。

/Lys-C 蛋白酶混合物是和 LysC 蛋白酶的冻干混合物，已经过优化以提高蛋白酶切效率。尽管通常用于蛋白酶切，但单独这一种蛋白酶并不足以酶切赖氨酸和残基的羧基端的蛋白。因此，Lys-C 蛋白酶通常与共同作用，以连续酶切蛋白，缺失切割较少。/Lys-C 蛋白酶混合物以 20 µg、5 x 20 µg 或 100 µg 灵活规格提供。根据酶与蛋白比值，酶切可在短短 1.5–3 小时内完成或者最长过夜完成。

、GluC、Asp-N 蛋白酶

• 增加序列覆盖范围—具有互补色谱、电离和片段化特性的重叠肽的蛋白表征结果较佳
• 高比活性—每种蛋白酶都具有的酶特异性
•稳定—以冻干形式提供

Asp-N 蛋白酶是一种 MS 级锌金属蛋白酶，来源于莓实假单胞菌的突变菌株，需要痕量锌来维持活性。Asp-N 蛋白酶主要在半氧化产生的天冬氨酸和半的氨基侧切割。也可能在残基切割；但是，谷氨酰基残基的切割率显著低于天冬氨酸残基的切割率。在 37°C 条件下，Asp-N 蛋白酶可在 2–20 小时内高效酶切蛋白，活性大于 20,000 单位/mg 蛋白，在变性条件（如 1 M 尿素、2 M 盐酸·胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 10% 乙腈）下仍可保持活性，在 pH 6–8 条件下具有较佳活性。该冻干酶的质量为 27 kDa，在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

Glu-C 蛋白酶也称为 V-8 蛋白酶，是从中分离获得的 MS 级蛋白酶。Glu-C 蛋白酶特异性切割碳酸氢铵和醋酸铵缓冲液中残基的羧基侧，产生少量的肽片段。在磷酸盐缓冲液中也可能在和天冬氨酸残基切割。在 37°C 条件下，Glu-C 蛋白酶可在 5–18 小时内高效酶切蛋白，活性大于 500 单位/mg 蛋白，在变性条件（如 2 M 尿素、1 M 盐酸胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 20% 乙腈）下仍可保持活性。在 pH 8 条件下，Glu-C 蛋白酶活性较佳。该冻干酶的质量为 27 kDa，在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

是一种从牛胰腺中分离获得的 MS 级胞内蛋白酶，特异性切割、苯、和的羧基侧。在牛胰腺中发现两种主要形式的 A 和 B，其含量相等。它们是相似的蛋白质（80% 同源性），但具有不同的蛋白水解特征。Thermo Scientific 有两种形式的。由于可能与天然来源的共纯化，Thermo Scientific 经 TLCK 处理以消除可能的活性，提高酶切特异性。可以耐受温和的变性条件，如 0.1% SDS、2 M 尿素、2 M 盐酸·胍、1% CHAPS 和 30% 乙腈，在 pH 7.5–8.5 条件下具有较佳活性。该冻干酶的质量为 25 kDa，在 -20°C 下储存时可保持稳定 1 年。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.