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当前位置:江苏菲亚生物科技有限公司>>技术文章>>江苏菲亚为您推荐确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤
1.
在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
2.
分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
3.
每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
4.
确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2~3代。
5.
在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
6.
重复步骤4。
7.
在无抗生素的培养基中培养4~6代,确定污染是否以已被消除。
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