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江苏菲亚为您推荐确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤

时间:2017-3-21阅读:211
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1.

在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。

2.

分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.250.501.02.04.0,8.0 mg/ml

3.

每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。

4.

确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度23倍浓度的抗生素的培养液培养细胞23代。

5.

在无抗生素的培养基中培养细胞一代。

6.

重复步骤4

7.

在无抗生素的培养基中培养46代,确定污染是否以已被消除。

 

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