ELISA实验不可忽视的小细节

酶联免疫吸附测定法，简称ELISA，是实验室zui常用的检测方法。 ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因此ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点。在ELISA中，酶标板起着举足轻重的作用，它是实验者获得可靠、稳定实验结果的保障，必须谨慎选择。

技术简介

酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay），简称ELISA，是实验室zui常用的检测方法。 酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质，其催化效力超过目前所有人造催化剂。ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不改变酶本身的活性。因此ELISA具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批标本的检测，广泛应用于食品安全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。

技术原理

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。主要有：直接法、双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法、应用亲和素和*系统（ABS）等。

ELISA必须遵守以下3个核心原理：（1）抗原或抗体能吸附于固相载体表面，并保持其免疫学活性；（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。

技术关键

在ELISA中酶起到很关键的作用，常用于ELISA法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其中尤以辣根过氧化物酶为多。酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结的产物,它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还能催化酶促反应，显示出生物放大作用。

酶标板作为ELISA检测实验中的辅材，起着举足轻重的作用并直接影响zui终实验结果，酶标板的好坏主要取决于其对蛋白吸附的灵敏度、板孔间蛋白吸附能力差异以及所采购酶标板批次间的差异。因此，选择一款蛋白吸附灵敏度高、对蛋白吸附能力孔间差异小、批次间差异小的酶标板产品，是实验者获得可靠、稳定实验结果的保障。

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