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了解HSP90β反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达。
通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。
经用G418进行筛选,对筛选出的阳性克隆用western blot检测HSP90β蛋白的表达。
结果:pcDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901,人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR,人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后,用G418筛选出的阳性克隆,分别被命名为:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。
通派生物 现货供应: 石膏样小孢子菌 ATCC 14683
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Westernblot检测结果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。
结论:HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90转染的细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表达的HSP90β蛋白减少,为研究HSP90下调对肿瘤细胞生 物学活性的影响提供了实验材料。
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1)细胞常规培养请严格遵照无菌操作;
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COV434细胞 培养条件: 培养基:90% RPMI-1640 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
Colo-16细胞 培养条件: 培养基:90% 高糖DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
COLO-1细胞 培养条件: 培养基:90% 高糖DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
CHO细胞 培养条件: 培养基:90% DMEM (含2mM L –谷氨酰胺) 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
CHL细胞 培养条件: 培养基:90% DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
CEF细胞 培养条件: 培养基:90% 高糖DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
DT40细胞 培养条件: 培养基:90% RIMP1640 血清:10% FBS 细胞特性: 悬浮
DRG细胞 培养条件: 培养基:90% 高糖DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
DOHH2细胞 培养条件: 培养基:90% 高糖DMEM 血清:10% FBS 细胞特性: 悬浮
DH82细胞 培养条件: 培养基:90% RPMI-1640 血清:10% FBS 细胞特性: 贴壁
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