上海研盟生物提供的“鸡孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒技术说明”，进口ELISA抗体对组装，保证实验效果，可提供免费代测服务，点击此处查看
详细的产品说明书请添加客服直接索取！
鸡孕激素/孕酮（PROG）酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
100 pmol/L -2500 pmol/L
使用目的：
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中孕激素/孕酮（PROG）含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡孕激素/孕酮（PROG）水平。用纯化的鸡孕激 素/孕酮（PROG）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入孕激素/ 孕酮（PROG） ，再与 HRP 标记的孕激素/孕酮（PROG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗 体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在 酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的孕激素/孕酮（PROG）呈正相关。用 酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中鸡孕激素/孕酮 （PROG）浓度。
操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 2400 pmol/L 5 号标准品 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 1200 pmol/L 4 号标准品 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 600 pmol/L 3 号标准品 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 300 pmol/L 2 号标准品 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 150 pmol/L 1 号标准品 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl， 然后再加待测样品 10µl（样品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
