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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物提供美国ATCC传代细胞株“Lec1细胞，仓鼠卵巢细胞"，进口来源，国内保种，活性保证，咨询：.
【友情提示】：产品价格与说明书请添加客服或来电询价，索要说明书；
产品名称：Lec1细胞，仓鼠卵巢细胞
细胞特性
细胞名称：Lec1 仓鼠卵巢细胞
组织来源：卵巢
培养条件：MEMα（含核苷和脱氧核苷） +10% FBS
形态：贴壁；上皮细胞样
背景：Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是从*缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶，从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响，这些细胞十分有用。
含量：>1x10的6次方 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
基本特性：
描述：（1）所有细胞株购自ATCC；
（2） 公司可提供新鲜或冻存细胞株；
（3） 细胞株数量约 1000000个/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代，提供复苏好的细胞株，贴壁及悬浮细胞形式，细胞状态良好，饱满、光泽度好，*，并提供细胞报价、所需培养基、种属来源、组织来源、形态、背景资料等。
细胞名称：Lec1仓鼠卵巢细胞
细胞描述：Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是从*缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。 Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶，从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。 对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响，这些细胞十分有用。 在本库通过支原体检测。
动物种别：中国仓鼠
组织来源：卵巢
形态：上皮细胞
培养基和添加剂：MEMα+培养基(GIBCO,货号11900024，添加NaHCO3 1.5g/L，肌醇 43.2mg/L, * 8.82mg/L,β-巯基乙醇 7.8mg/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。
REFERENCE：Stanley P , et al. Selection and characterization of eight phenotypically distinct lines of lectin-resistant Chinese hamster ovary cells. Cell 6: 121-128, 1975. PubMed: 1182798 Stanley P , et al. Chinese hamster ovary cells selected for resistance to the cytotoxicity of phytohemagglutinin are deficient in a UDP-N-acetylglucosamine-- glycoprotein N-acetylglucosaminyltransferase activity. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 72: 3323-3327, 1975. PubMed: 1059116
细胞用途：仅供科研使用。
Lec1细胞，仓鼠卵巢细胞复苏方法
1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。
3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加10ml培养液，吹打使细胞悬浮。
4．低速离心（500～1000转/分）5分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。
我公司认为购买细胞的客户有培养细胞的经验，客户收到细胞，原瓶里的培养液可以收集继续使用，在*次消化传瓶时，我们要求客户留一瓶细胞继续使用我们的培养液，其它瓶的细胞客户可使用自己的培养液，这样可减少由于细胞不适应培养液导致的细胞问题。
来源有保障（世界*品牌），状态且传代次数好，经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。每管含有细胞数>1000000个，具有高品质、高纯度、高稳定性等特点，纯化技术保证产品性能。
运输方式：活细胞运输（T-25 flasks）。
细胞纯度：95%。
细胞来源：ATCC等。
包装：内层无菌自封袋，防压泡沫盒，外层防压保温气泡袋，说明书。
用途：本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。
细胞冻存
１．将细胞消化下来，移入离心管离心，弃上清
２．准备冻存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培养基＋１０％ＤＭＳＯ（现用现配）
３．加１．５冻存液在离心管中，将细胞吹打均匀，移入冻存管内．
放入－２０度冰箱２－４小时后．再放入－８０度冰箱过夜，第二天放入液氮罐保存.
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，zui后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至zui终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
传代时间：2-3天 3-5天
传代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
细胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞实验安全性：所有细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
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