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*与抗*之间具有*的亲和力,可以缩短反应时间,达到快速检测的目的。另外,抗体和酶的*标记率高,又不影响其活性,每个亲和素分子能结合4个*,每个*能标记大量酶分子,使得ELISA的敏感性大大提高,*与亲和素的结合也极为稳定,ELISA试剂盒不会在洗涤过程中脱落。BA-ELISA是在常规ELISA的基础上,结全*(Biotin)与亲和素(Avidin)的高度放大作用,形成的一种检测方法。BA-ELISA分为:
1,LAB法即酶联亲和素-*标记法(Labeledavidin-biotin,简称LAB)。用辣根过氧化物酶直接标记亲和素,用*标记第二抗体。
2,ABC法即酶联亲和素-*-过氧化物酶复合物法(Avidin-Biotin-PeroxidaseComplex,简称ABC)。如用链霉亲和素(Streptavidin),则形成链霉亲和素-酶联*复合物(Streptavidin-Biotin-PeroxidaesComplex,简称SABC)。在ABC法中,用*标记第二抗体,ELISA试剂盒又用*标记过氧化物酶。在使用前30min,亲和素与酶联*以1:1的比例混匀。1个亲和素分子结合3个*分子,亲和素剩下的1个结合点与标记第二抗体的*结合,亲和素起桥联作用。ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidasetech-nique)法敏感几十倍。
3,BAB法即酶联亲和素-*桥法(Bridgedavidin-biotin,简称BAB)。用游离亲和素(或链霉亲和素)作为桥联剂,将*标记后开成的复合物与酶标记*连结起来,然后进行样品的检测。由于标记抗体分子上连有多个*,因此,ELISA试剂盒zui终形成的抗原-*标记抗体-亲和素-酶标*复合物可积聚大量的酶分子;加入相应底物后,产生强烈的酶促反应,大幅度提高检测的灵敏度。
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