ELISA试剂盒色彩的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
这即是为何ELISA检查试剂盒反响总是需求必定时刻的温育。
温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃（冰箱温度）等。
以抗体包被的夹心法为例，参加板孔中的标本，其中的抗原并不是都有平等的和固相抗的时机，为加速反响，可进步反响的温度，有些试验在43℃进行，但不宜选用更高的温度。
只有zui靠近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。
这是一个逐，因此需经分散才能到达反响的终点。
在其后参加的酶符号抗体与固相抗原的也相同如此。
37℃是试验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体的适宜温度。
ELISA试剂盒属固相免疫测定，抗原、抗体的只在固相表面上发生。
在树立ELISA办法作反响动力学研讨时，试验标明，两次抗原抗体反响通常在37℃经1-2小时，产品的生成可达。
抗原抗体反响4℃更为*，在放射免疫测定中多使反响在冰箱中，以形成zui多的沉积。
再通过温育和洗刷，去掉未的酶物，然后参加底物A、B，和酶物一起效果。
但因所需时刻太长，在ELISA检查试剂盒中通常不予选用。
ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）.已知浓度的规范品、不知道浓度的样品参加微孔酶标板内进行检查。
先将*符号的抗体一起温育。
ELISA试剂盒洗刷后，参加亲和素符号过的HRP。