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ELISA试剂盒实验的标准曲线和测定的重复性差是何原因

时间:2016-12-15阅读:115
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ELISA试剂盒实验的标准曲线和测定的重复性差,这是什么原因造成的?

答:试验的标准曲线和测定的重复性差,这是典型的由测定操作引起的问题,常见原因如下:

a)可能原因:加样本及试剂量不准;孔间不一致;

解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。

重复某一样品时,加样时间尽可能与*次接近;

重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;

样品稀释前应充分混匀。

b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;

解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。

c)可能原因:加错样本;

解决方法:检查记录和试剂,是否加错样本。

d)可能原因:加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;

解决方法:加样枪头不要贴壁。

e)可能原因:不同批号试剂盒中组分混用;

解决方法:不同批号试剂盒中组分不可混用。

f)可能原因:温育时间、洗板、显色时间不一致;

解决方法:检查时间是否一致。

g)可能原因:孔内污染杂物;

解决方法:离心样品,排除杂物。

h)可能原因:试剂/样品没有混匀;

解决方法:充分混匀样品和试剂。

i)可能原因:血清标本未*凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血

细胞,易出现假阳性反应等。

解决方法:待血清标本*凝固后做试验。

 

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