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人LR/Ob-Relisa试剂盒产品特点:
1.即用型溶液:无需混合;
2.方便快捷;反应灵敏度高;
3.不低于A.B液;
4.背景低:底物溶液在650nm检测时检测OD值小于0.04;
5.产品批间差小。
注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈,为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数。或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
人LR/Ob-Relisa试剂盒操作程序:
1.将试剂盒从冷藏环境中取出并将所需试剂从试剂盒取出,置室温(20-25 ℃)平衡30 min以上, 注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2.按需要取出微孔条及板架,将不用的微孔板重新密封,保存于2-8 ℃,不要冷冻。
3.加标准品/样本50 μL /孔,然后加入抗体工作液50 μL /孔,再振荡混匀,用封板膜盖板,37 ℃反应30 min。
4.洗板4-5次,每次浸泡30秒,拍干。
5.加入酶标记物100 μL /孔,用封板膜盖板,37 ℃反应20 min。
6.洗板4-5次,每次浸泡30 s,拍干。
7.显色:每孔加入底物缓冲液50 μL,再加底物液50 μL,轻轻振荡混匀,37 ℃环境避光显色10 min。
8.测定:每孔加入终止液50 μL,轻轻振荡匀,设定酶标仪于450 nm处(在20 min内读完数据),测定吸光度值。
检测结果准确可靠的必要条件:
1. 加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
2. 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3. 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
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