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土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒

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所  在  地盐城市

更新时间:2019-04-30 09:20:51浏览次数:477次

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土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒试剂准备:

1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:

500pg/ml

(6号标准品)

原倍浓度不用稀释直接加入50ul

250pg/ml

(5号标准品)

100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液

125pg/ml

(4号标准品)

100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液

62.5pg/ml

(3号标准品)

100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液

31.2pg/ml

(2号标准品)

100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液

15.6pg/ml

(1号标准品)

100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液

0pg/ml

(空白对照)

原倍浓度不用稀释直接加入50ul

2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒的操作流程:

1.在各孔中加入标准品或样品各100μL,37孵育90分钟;

2.加入100μL 生物素化抗体工作液,37孵育60分钟;

3.洗涤3次;

4.加入100μL酶结合物工作液,37孵育30分钟;

5.洗涤5次;

6.加入90μL底物溶液,37孵育15分钟左右;

7.加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值;

8.结果计算。

土壤酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒的结果判断与分析:

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的LAM标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的LAM含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3检测值范围:0-480ng/ml
4、敏感度:0.1ng/ml

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