【中国仪器网 使用手册】凝胶色谱法又被称为凝胶色谱技术，是一种效果好并且操作简单的分离分析技术。SRT色谱柱在分析分离操作时，并不需要有机溶剂，所以一般对高分子物质有很高的分离效果。SRT凝胶色谱柱现今广泛应用于生物分子及水溶性聚合物的分离和检测，而该款色谱柱的制作工艺采用可控的化学修饰技术，因此可以确保色谱柱与色谱柱之间有着可靠的重现性，并且SRT色谱柱设计的大孔体积可保证高的分离容量以及优异的分辨率。　　以下便是罗列的SRT凝胶色谱柱的一些特点：　　1.高柱容量、高分辨率　　SRT凝胶色谱柱其精心设计的大孔体积可保证高的分离容量以及优异的分辨率。　　2.pH范围宽 (pH范围2-8.5)　　SRT凝胶色谱柱的pH范围让其能够帮助分析分离各类物质。　　3.使用寿命长　　SRT凝胶色谱柱本身的SRT SEC键合固定相采用的是表面修饰技术，通过在高纯度具有良好机械稳定性的硅胶基质上，键合一层均匀的纳米厚度中性亲水薄膜而制备成的，因而有较长的使用寿命。　　4.低盐浓度洗脱，适合LC-MS分析　　LC-MS分析技术能够以非常高的灵敏度同时测量多种复杂分析物。同时成功的LC-M分析具有高度灵敏度，具有可追溯性强和数据可靠的特性。因而低盐浓度洗脱对分析效率来讲有很大的帮助　　5.较低的非特异性吸附,对于生物样品无强吸附，较高的蛋白回收率及活性回收率　　SRT凝胶色谱柱的填料采用化学键合技术，表面亲水涂层覆盖，因此SRT凝胶色谱柱在使用时不仅具有较好的稳定性，而且对蛋白等生物样品的非特异性吸附作用也非常小。　　6.解决多维色谱分析应用　　SRT凝胶色谱柱可以解决多维色谱分析应用在实际操作中的问题。　　SRT凝胶色谱柱在使用时也有些操作需要注意，不然会影响到SRT凝胶色谱柱的使用效果。以下是SRT凝胶色谱柱的使用注意事项：　　1.预先测量　　在SRT凝胶色谱柱安置好了之后，测量就开始了。所以在操作SRT凝胶色谱柱时，在安置好后，应避免溶液的进样或者过快的压力增长，这些情况可能会导致SRT凝胶色谱柱柱效下降。　　2.防止流速的波动　　SRT凝胶色谱柱很容易受到流速波动的影响，所以需要使用没有压力波动的泵，如果使用有压力波动的泵，那么就需要在泵的出口处连接一个脉冲节气门以防波动，并且节气门应非常耐受腐蚀。 影响色谱柱性能因素

　　色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。

　　一、物理因素：

　　(1)硅胶纯度：硅胶纯度和残留金属离子浓度，硅胶的杂质会影响化合物的峰形，硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形，易发生拖尾。

　　(2)色谱柱尺寸填料床的长度和内径，增加色谱柱长度，可以在一定程度上提高柱效，但也会升高压力和导致峰展宽；宽柱径，提高载样量，但也会增加横向扩散，同样会导致峰展宽。窄柱径可以节约溶剂，可减少横向扩散，但压力较大，对系统要求较高。

　　(3)颗粒形状及粒径球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀，不规则形柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀，容易谱带展宽；平均颗粒直径，粒径越小，柱效越高，柱压也越高。粒径分布越广则柱效越低，压力越大。

　　(4)颗粒表面积：颗粒外表面和内部孔表面的总和，以m2/g表示，相对而言高表面积对样品具有较强的保留能力，更大的柱容量和分离度。而低表面积能更快达到平衡状态，更适合梯度洗脱程序。

　　(5)孔径：颗粒的孔或腔的平均尺寸，范围是80~300?，大孔径的填料颗粒可以延长大分子溶质在填料表面的滞留时间，改善分离，所以大孔径填料适合分离大分子化合物或者水动力体积较大的分子。

　　二、化学因素：

　　(1)键合类型及键合相：键合相分子与基体单点相连为单体键合，这种键合方式可以提高传质速率，缩短柱平衡时间；聚合体键合为键合相分子与基体多点相连，这种键合方式可以增加色谱柱稳定性，增加载样量。而键合相不同会直接影响化合物的保留行为。

　　(2)碳覆盖率：高碳覆盖率可以提高分辨率和重现性，但分析时间长。

　　(3)封端：硅胶键合相填料中有部分未封端的残留硅羟基，如图封端可以减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应，改善保留和峰行，这对于碱性化合物尤其重要。而不同的封端技术也会直接影响色谱柱的效能。