7.用1L0.15MNaCl溶液常温避光透析4小时除去未标记上的Cy3。
注射200μL(0.5mg/g)[用量和时间需要客户根据自己的仪器和药物试剂等条件优化],每5min记录1
分子结构： 一般性质：外观：红色粉末分子量：590.15质谱分析M+增量：474.2分子式：C34H40ClN3O4溶解性：溶于有机溶剂（DMF,DMSO,二氯甲烷），不溶于水质控：NMR1H（95%）和13C,TLC,功能测试
菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是较高的，其琥珀酰亚胺酯是常
分子结构：一般性质：外观：深红色粉末分子量：631.67质谱分析M+增量：516.2分子式：C37H33N3O7CAS号：117491-83-5溶解性：易溶于有机溶剂（DMF,DMSO），略溶于水质控：NMR1H（95%）和13C,TLC,功能测试
分子结构：一般性质：外观：暗蓝色粉末分子量：616.19分子式：C36H42ClN3O4溶解性：易溶于有机溶剂（DMF,DMSO和氯化物），难溶于水质控：NMR1H（95%）和13C,TLC，功能测试
另外，Cy5，Cy5.5和Cy7的吸收在近红外区背景非常低，荧光强度高、稳定的长波长染料。特别适合于活体小动物体内成像代替放射性元素。但由于菁染料，尤其是不对称菁染料的合成副反应多，副产物极性相近，产物的分离提纯相当复杂。
Cy3.5NHS酯是标记多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料Cy3.5NHS酯可替代AlexaFluor594,DyLight594的NHS酯
光谱性质：大激发波长：673nm在大激发波长下的消光系数：209000Lmol-1cm-1大发射波长：707nm荧光量子产率：0.2
F/P值分别是0.28:1,1.16:1,2.3:1和4.6:1。
F/Pfinal=[dye]/[peptide]={0.68×A650}/{A280-(0.05×A650)}
5.用0.1MNaHCO3稀释少量的抗体，在280nm处测其紫外吸收值计算标记抗体的总量(IgGantibody
Cy5.5NHS酯标记多肽，蛋白和寡核苷酸的氨基Cy5.5NHSester：是近红外染料，除了用于标记多肽，蛋白和寡核苷酸氨基的活性染料，可用于后续的小动物活体成像实验。染料可代替AlexaFluor680NHSester和DyLight680NHSester
000M-1cm-1;Cy5在280nm处的吸收是650nm处的5%。按以下公式计算F/P值。
不同蛋白的摩尔吸光系数不一样;.Cy3染料本身在280nm的吸收是552nm处的8%。按以下公式计算F/P
3.用HPLC纯化蛋白，使用蛋白C18柱子(25cm×10mm)，每次上样注入2×400μL，30分钟梯度洗脱
从0.1%TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1%TFA)=70∶30，流速4mL/min。(对不同的蛋白选择不
脱盐，用5.0mMborate缓冲液平衡到pH=8.0，然后用以上硼酸缓冲液冲下OLIGO。然后浓缩至干的样
1.在1L0.15MNaCl溶液中透析anti-GST抗体(浓度为0.5mLat3mg/mL)，常温透析4小时。
分子结构：
F/P计算：
Cy7检测时激发波长700～770nm带通,发射波长790nm长通。液晶可调谐滤光片扫描范围780～
3.1水溶性Cy3NHS标记anti-GST多克隆抗体
[Cy5dye]=(A650)/250000
2.菁染料琥珀酰亚胺酯(CyDyeNHS)的标记
注意：Oligonucleotides和oligopeptides由于太小经常会留在过滤膜上或在冻存管内贴壁
4.用0.22μm注射器过滤头过滤抗体溶液。
未开封的粉末在避光干燥-20℃存放12月。CyDyeNHS水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的CyDye
ROX（罗丹明X又叫R101）是具有多种用途的高荧光性，不感光的罗丹明染料。ROX标记的寡核苷酸探针经常被用于qPCR及具有ROX通道的qPCR设备标记多肽，蛋白和氨基-寡核苷酸的活性染料，此染料可代替AlexaFluor568
分子结构：一般性质：外观：暗紫色粉末分子量：732.35分子式：C45H50ClN3O4溶解性：溶于有机溶剂（DMF,DMSO，二氯甲烷），不溶于水质控:NMR1H（95%）和13C,TLC，功能测试
一般性质：外观：深蓝色粉末分子量：716.31分子式：C44H46ClN3O4溶解性：溶于有机溶剂（DMSO,DMF,二氯甲烷），在水中不易溶解质控：NMR1H(95%)13C,TLC,功能测试
8.在4°C用新鲜的1L0.15MNaCl溶液再避光透析过夜。
光谱性质：大激发波长：591nm在大激发波长下的消光系数：116000Lmol-1cm-1荧光量子产率：0.35
后避光保存。
光谱性质：大激发波长：646nm在大激发波长下的消光系数：250000mol-1cm-1大发射波长：662nm荧光量子产率：0.2
涤掉所有的残余氨水。然后将样品真空干燥;然后溶于0.25ml的0.5MNaCl溶液中，用SephadexG-50
11.用0.01MPBS/0.01%N3 化钠整数倍稀释标记抗体溶液，测量280nm(蛋白)和552nm(Cy)处
分子的生物活性，标记生物分子用单琥珀酰亚胺酯较合适，但是用双修饰的CyDyeNHS并没有发现交联。
5.产品冷冻干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光储存;必要时可用质谱表征。
Cy3NHS酯是标记生物分子氨基的活性染料，此试剂可标记溶解蛋白，多肽和寡核苷酸/DNA。对于比较敏感的蛋白请选择无需任何共溶剂的，可溶于水的磺酸基-Cy3NHS酯。
Cy5在生命科学研究和诊断领域是非常常用的荧光团。此荧光团在红色区域有大发射，许多CCD检测器有大灵敏度。Cy5NHS酯是标记多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料。染料需要少量的有机共溶剂（比如DMF和DMSO）溶解后进行标记反应。此试剂可以标记溶解蛋白和各种多肽，寡核苷酸的氨基。对于易降解的蛋白，不可使用DMF或DMSO，应选择我们的不需任何共溶剂的sulfo-Cy5NHS酯，两者具有非常相似的荧光特性。
CyDyemono-reactiveNHSEsters(菁染料琥珀酰亚胺酯)
长度,可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Huoffman规则正好红移约100nm。
光谱性质：大激发波长：555nm在大激发波长下的消光系数：150000Lmol-1cm-1大发射波长：570nm荧光量子产率：0.31
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