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江苏菲亚生物科技有限公司
主营产品： 转化生长因子 elisa试剂盒,植物叶酸 elisa试剂盒,猪蓝耳(PRRS)elisa kit |
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WB实验的锦囊妙计
2017-3-9 阅读(1034)
Western Blot实验它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。于此同时，我们好多客户反映做该实验检测失败，由此分析：WB实验真的不好做，还是客户没有把握好WB实验的注意事项或者小诀窍？现恒远公司年终总结做WB实验的锦囊妙计：
1.清洗好玻璃板，我公司技术强调这一步工作不能偷懒，很多时候跑完电泳撬胶时会因为玻璃板不干净胶粘在板上把胶撬破。
2. 配胶时不要反复用枪混，稍微摇混就可以了，用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。
3. AP 分装成500 微升一管保存放20 度，避免 AP 用太久失效。
4. 倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干，因为微量的水存在会影响配的胶浓度。
5. 尽量不用过ye放室温或者四度的胶，也回影响胶 的分离效果。
6. 电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板，在一平皿里装好水，把有胶一面的放在水中晃动几
次胶很容易就脱落下来，一点没有问题，方便的很。
7. 点样时样品别忘了离心这步，因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。
8.尽量在冰浴状态下跑
