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江苏菲亚生物科技有限公司
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微藻基因组提取的方法概述
2017-3-9 阅读(981)
微藻基因组提取的方法主要有以下几种：
1、采用CTAB法
2、收集藻体
3、液氮研磨
4、加入CTAB提取液
5、苯酚抽提、乙醇沉淀
6、洗涤
一般来说，液氮研磨是的方法。原因如下：
1、液氮冷冻使得藻体变脆，易于破碎。
2、液氮研磨的力度，一般不会对基因组DNA造成机械损伤。
3、在低温下，各种酶包括核酸酶的活性较低，可以zui大程度防止核酸的降解，这点在制备RNA的时候，尤为重要。所以，在制备微藻基因组时，应该尽量用液氮研磨。
当然，用液氮往往比较麻烦；并且有潜在的危险，所以在某些情况下，也可以用一些替代性的方法，主要分为三类：
*类、常温研磨。即用玻璃匀浆器或者组织匀浆机来破碎细胞，但需要做一些与实验来确定研磨的时间/力度。
第二类、酶解。即用针对于研究对象细胞壁成分的酶，来酶解细胞壁，进而达到破碎细胞的目的。常用的酶有果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶、溶菌酶、海螺酶、蜗牛酶以及DRISELASW 崩溃酶，同样需要做预试验确定酶的种类和用量，以及酶解时间。
第三类、使用强的裂解液。例如异硫氰酸胍等，经过长时间浸泡，可以“溶解”藻细胞。
