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江苏菲亚生物科技有限公司
主营产品： 转化生长因子 elisa试剂盒,植物叶酸 elisa试剂盒,猪蓝耳(PRRS)elisa kit |
公司信息
人ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
2018-2-8 阅读(1773)
人ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法：
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人ELISA试剂盒实验原理：
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过*洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。
实验过程中需要用到的器材：
1.标准规格酶标仪；
2.高速离心机；
3.电热恒温培养箱；
4.干净的试管和Eppendof管；
5.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器；
6.蒸馏水，容量瓶等。
实验操作注意事项：
1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
