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人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒

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更新时间:2017-03-20 08:40:41浏览次数:77次

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中文名称:人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒
英文名称:Human NAP3 Elisa Kit
检测范围:或在线客服
本公司*售前、售中、售后服务,为您解决实验过程中的问题。可提供免费代测服务

人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒技术流程:

双抗体夹心法(检测未知抗原)

间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

 

产品介绍:

产品名称:人中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)ELISA试剂盒

英文名称:Human NAP3 ELISA Kit

产品编号:YMH12139

人NAP3试剂盒产品规格:

48T(48T检测双标准的可以检测37个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照。48T检测单标准可以检测40个样本,其他有7个标准品孔,1个空白对照。 )

96T(96T检测双标准的可以检测85个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照。96T检测单标准可以检测90个样,7个标准品控 1个空白对照。)

实验设备及操作步骤

人中性粒细胞激活蛋白3试剂盒检测方法都可以通过标准酶标仪使用。

1. 标准品的稀释:ELISA试剂盒内附标准品一支,用户在小试管中进行稀释。

2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育

8. 洗涤

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

 

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