上海研盟生物科技有限公司Anti-PACAP receptor抗体*,主要应用于WB、IHC、IF、ELISA、流式细胞术等实验中。说明书随货发送,您也可以直接我司在线客服索取。客服:.
各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):
1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;
2、37°C包被60min或4°C过夜;
3、PBST洗板3次,5min/次;
4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;
5、37°C 30min;
6、PBST洗板5min/次×3;
7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;
8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;
9、450nm 测定OD值;
10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。
腺苷酸环化酶激活肽受体1抗体,Anti-PACAP receptor抗体简单介绍:
英文名称:Anti-PACAP receptor antibody
中文名称:腺苷酸环化酶激活肽受体1抗体
产品别名:ADCYAP1 R1; ADCYAP1R 1; PACAP-R1; adenylate cyclase activating polypeptide 1 (pituitary) receptor type 1; PAC 1; PAC1; PAC1R; PACAP R 1; PACAP1 R; PACAPR; PACAPRI; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide 1 receptor type I Hiphop; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide receptor; Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide type I receptor precursor; PACR_HUMAN.
产品规格:0.1ml、0.2ml、1ml
产品用途:科研实验
产品价格:请报价
说明书:请添加客服直接索取
抗体来源:该指标有两种产品,一种是兔来源抗体,一种是鼠来源抗体
克隆类型:兔来源为多克隆抗体,鼠来源单克隆抗体
交叉反应:请索取说明书查看
性 状:Lyophilized or Liquid
浓 度:1mg/1ml
亚 型:IgG
纯化方法: affinity purified by Protein A
储 存 液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol
背景介绍: Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) is a neuropeptide belonging to the vasoactive intestinal polypeptide/glucagon/ secretin family. It is widely distributed in the body, and a variety of biological actions have been reported. Recent studies have shown that there is a family of PACAP receptors (PACAPRs), and two members of this family have been identified. This is a receptor for PACAP-27 and PACAP-38. The activity of this receptor is mediated by G proteins which activate adenylyl cyclase. May regulate the release of adrenocorticotropin, luteinizing hormone, growth hormone, prolactin, epinephrine, and catecholamine. May play a role in spermatogenesis and sperm motility. Causes smooth muscle relaxation and secretion in the gastrointestinal tract (By similarity). Belongs to the G-protein coupled receptor 2 family.
腺苷酸环化酶激活肽受体1抗体保存条件: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
组织固定时间和所需的抗原热修复的关系
大量的实验表明,固定时间越长的标本,它所形成的桥连就越紧密,抗原就越难以被激活,所需要的修复强度也就越强。有意思的是随着固定时间的延长,组织中蛋白对温度的耐受也相应增高,这可能就是我们对固定时间长的标本加大修复强度的理论基础。
这就提醒我们在做回顾性的研究时一定要注意所使用的修复条件,它与新鲜标本的修复条件一定是有所区别的,同等条件下一定要加长修复的时间或提高修复所使用的温度,才可能得到比较满意的结果。
不同pH值抗原修复液对染色结果的影响
抗原热修复中所使用的修复液pH值也会对染色结果产生相当大的影响。
pH值对染色结果的影响大概可以分为以下四种情况:
A.稳定型,pH值对染色结果影响不大,如PCNA、AE1、EMA、CD20等;
B.V型,高pH值和低pH值染色较好,而pH值4-5染色结果较差,如ER、Ki-67等;
C.上升型,随着pH值的增加,染色结果逐渐增强,如HMB45等;
D.下降型,随着pH值的增加染色结果逐渐减弱,当然这种类型的抗体只是个别的现象,如MOC31。
一个有趣的现象值得注意,即在高pH值都有较好的染色结果,所以目前比较推崇的抗原修复液为高pH值得修复液,如1mMEDTA, pH8.0或pH9.0等。但是由于传统习惯,绝大多数医院和实验室都在使用pH6.0的枸橼酸缓冲液。综合以上各种抗体的染色状况,考虑到临床工作的实际情况,许多国外免疫组化专家建议,在常规的免疫组化工作中,全部选用高pH值得修复液来代替目前广为使用的pH6.0枸橼酸缓冲液。为此,本公司已经推出pH8.0和pH9.0的新型抗原修复液。经验证,绝大多数的抗体使用pH9.0得修复液效果都要优于pH6.0的枸橼酸,尤其是核阳性的抗体。所以,在常规的免疫组化工作中,使用高pH值的抗原修复液是今后的必然趋势。
腺苷酸环化酶激活肽受体1抗体,Anti-PACAP receptor抗体部分实验介绍:
有关免疫组化实验的重要问题
(一)组织材料处理
1.取材要取新鲜组织,大小合适,用生li盐水洗净
2.固定固定就是把病理标本组织浸泡在固定液中(常用的有4%多聚甲醛),使组织或细胞内蛋白质凝聚、沉淀或变性成为不溶性物质,并保持细胞原有的形态结构
3.洗涤固定后一定要把渗透到组织里面的固定液洗去,以利于进行脱水,若组织中留有较多的固定液,则将影响脱水剂,甚至可在组织中发生沉淀而影响后续染色及观察,对于陈旧性标本或固定时间过长的标本,更应注意流水冲洗。
4.脱水脱水必须*,若脱水不尽,则切片后组织与空气接触即干燥收缩,蜡块切面出现凹陷现象,虽可勉强切片,但染色效果差,染色时也容易脱落
5.透明乙醇等脱水剂不能溶解石蜡,所以浸蜡之前需要一个既能与乙醇混合又能溶解石蜡的媒剂,以便使石蜡浸入到组织中去,当组织中全部被透明剂占有时,光线可以透过,组织可呈现不同程度的透明状态,此现象称为透明。如果组织不能透明,表明脱水未尽必须重新返工,否则影响到浸蜡的进行,但返工时往往效果不好
6.浸蜡浸蜡时间根据组织的类型可适当调整,一般原则较小组织脱水时间和浸蜡时间较短;骨、肌肉等坚硬组织脱水和浸蜡时间不宜过长;脂肪组织、疏松结缔组织脱水和浸蜡时间需增加
7.包埋包埋时应注意组织的包埋方向,否则将影响组织切片的形态。包埋用的石蜡要和浸蜡用的石蜡熔点*,包埋用的石蜡温度要稍高于浸蜡的温度。包埋好后可置于冷水中使石蜡迅速冷凝。包埋好的石蜡块应呈均匀的半透明状,如出现白色浑浊则其中存在石蜡的结晶,这种蜡块不能切除薄的切片。可能是组织脱水不充分,组织内或石蜡中混有透明剂,或包埋时动作太慢或石蜡凝固太慢所致,所以冷却时水温不能过高,否则就不宜迅速凝固
8.切片可以将制作好的蜡块置于低温环境预冷,切出的切片连续性较好,有利于展片,一般切片厚度4-6um
(二)抗原修复
组织在制作过程中,由于固定液的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题,利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。
上海研盟生物科技有限公司常用的抗原修复液有:0.01M枸橼酸(pH6.0)、0.05M EDTA(pH8.0)、0.01M TBS(pH7.4)、*、*
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