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大鼠细胞角蛋白19(CK19)ELISA试剂盒操作步骤：

1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9．在450nm波长处测定各孔的OD值。

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技术问答：

问：一般免疫组化的话，对于标本有没有要求    新鲜的？保存一段时间的石蜡切片？还是冰冻的标本现做比较好？我们有保存一段时间的石蜡切片   和冰冻的组织    这两种做免疫组化都可以么答：没有要求，甲醛固定，石蜡包埋问：存放一段时间的石蜡切片也是可以做的？有要求吗？放了几年的也行？

答：只要制备成切片，就没有问题，做的时候抗原修复下就行

问：小鼠糖磷脂酰肌醇抗体(GPI Ab)ELISA试剂盒，看说明书只有5个标准品浓度吗？一般ELISA都是8个浓度吧

答：标准品浓度有的是5个，有的是7个，有的是8个，这个是没有限定的

问：人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒，从兔子里面产生的抗体再纯化，还是直接从人的血清中纯化出LC1抗体

答：是在兔子体内的，抗原注射到兔子体内