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大鼠褪黑素(MT)ELISA试剂盒操作步骤

     方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“ "、“-"号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
方法二　用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法"的4、5、6。

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技术问答：

问：人鼻咽癌癌基因抗体能和人鼻咽癌细胞表面的抗原结合吗

答：可以

问：我就是要做免疫组化实验 样本是绵羊 需要鼠抗绵羊1型和3型胶原蛋白抗体，二抗是*标记绵羊抗小鼠IgG 山羊血清和DAB显色试剂盒都有 想用SABC法做免疫组化实验 还需要买些什么呢？

答：我们的免疫组化试剂盒整套基本齐全了，不需要再另外购买什么了，再就是TBS和PBS缓冲液需要自行购买了，这些都不是主要的，一般实验室都配有的

问：我自己包被检测，我实验采用免疫夹心法检测HBs Ag，因此需要两个HBs Ag抗体，这两个抗体分别要与HBs Ag抗原上的不同抗原决定簇作用，有符合条件的抗体出售吗

答：有的，一个抗体包被，另一个抗体我们用HRP标记好了，一抗是兔源，二抗羊源