淋巴细胞抗原6B抗体，Anti-Neutrophil/Ly-6B抗体-上海研盟生物工程有限公司

背景介绍：Cell membrane; Lipid-anchor, GPI-anchor

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中文名称：淋巴细胞抗原6B抗体

英文名称：Anti-Neutrophil/Ly-6B antibody

淋巴细胞抗原6B抗体，Anti-Neutrophil/Ly-6B抗体-有关免疫组化实验的重要问题

（一）组织材料处理

1.取材要取新鲜组织，大小合适，用生理盐水洗净

2.固定固定就是把病理标本组织浸泡在固定液中（常用的有4%多聚甲醛），使组织或细胞内蛋白质凝聚、沉淀或变性成为不溶性物质，并保持细胞原有的形态结构

3.洗涤固定后一定要把渗透到组织里面的固定液洗去，以利于进行脱水，若组织中留有较多的固定液，则将影响脱水剂，甚至可在组织中发生沉淀而影响后续染色及观察，对于陈旧性标本或固定时间过长的标本，更应注意流水冲洗。

4.脱水脱水必须*，若脱水不尽，则切片后组织与空气接触即干燥收缩，蜡块切面出现凹陷现象，虽可勉强切片，但染色效果差，染色时也容易脱落

5.透明乙醇等脱水剂不能溶解石蜡，所以浸蜡之前需要一个既能与乙醇混合又能溶解石蜡的媒剂，以便使石蜡浸入到组织中去，当组织中全部被透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此现象称为透明。如果组织不能透明，表明脱水未尽必须重新返工，否则影响到浸蜡的进行，但返工时往往效果不好

6.浸蜡浸蜡时间根据组织的类型可适当调整，一般原则较小组织脱水时间和浸蜡时间较短；骨、肌肉等坚硬组织脱水和浸蜡时间不宜过长；脂肪组织、疏松结缔组织脱水和浸蜡时间需增加

7.包埋包埋时应注意组织的包埋方向，否则将影响组织切片的形态。包埋用的石蜡要和浸蜡用的石蜡熔点*，包埋用的石蜡温度要稍高于浸蜡的温度。包埋好后可置于冷水中使石蜡迅速冷凝。包埋好的石蜡块应呈均匀的半透明状，如出现白色浑浊则其中存在石蜡的结晶，这种蜡块不能切除薄的切片。可能是组织脱水不充分，组织内或石蜡中混有透明剂，或包埋时动作太慢或石蜡凝固太慢所致，所以冷却时水温不能过高，否则就不宜迅速凝固

8.切片可以将制作好的蜡块置于低温环境预冷，切出的切片连续性较好，有利于展片，一般切片厚度4-6um

规格：0.1ml/0.2m

浓度：1mg/1ml

抗体来源：本公司抗体有兔来源和鼠来源等

克隆类型：兔来源为多抗，鼠来源为单抗

产品类型：一抗

淋巴细胞抗原6B抗体，Anti-Neutrophil/Ly-6B抗体简单介绍：

别名：Neutrophil; Ly-6B; Ly6b; Lymphocyte antigen 6B; Lymphocyte antigen 6B Short name=Ly-6B.

此产品本公司有标记的一抗出售，相关标记有：Alexa Fluor 350 标记、Alexa Fluor 488 标记、Alexa Fluor 555 标记、Alexa Fluor 647 标记、AP标记、APC标记、Biotin标记、Cy3标记、Cy5标记、Cy5.5标记、Cy7标记、FITC标记、Gold标记、HRP标记、PE标记、PE-Cy3标记、PE-CY5标记、PE-CY5.5标记、PE-CY7标记、RBITC标记

常用的抗原修复方法：

方法1：沸水浴修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境，保持外部沸腾状态15min，自然冷却至室温。

方法2：微波修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷却至室温。

方法3：高压修复，修复液加入高压锅加热至沸腾，放入玻片，封盖加压持续加热至喷气时开始计时修复2min，自然冷却至室温。

方法4：使用*修复，将*修复液加入到组织上，37℃，消化30min

抗原修复，必须注意以下问题：

1、修复液的选择。

0.01M枸橼酸（pH6.0）：应用zui多的抗原修复液，适用于大多数的抗原，用该液修复后的抗原表达增强，抗原的定性和定位很理想，结果不错;

0.05M EDTA（pH8.0）：应用较多的抗原修复液，修复能力较强，对于保存时间较长的切片或目的蛋白表达较弱的组织有很好的修复效果，需要控制好修复时间，否则容易出现较重的背景;

0.01M TBS（pH7.4）：中性修复液，适用于大多数抗原，对于核定位蛋白有较好的修复效果;

*：应用较多的抗原修复液，适用于大多数的抗原，使用温度37℃，对于容易脱片的切片有很好的保护作用。

*：应用较多的抗原修复液，适用于大多数的抗原

2.抗原热修复时应选择温度。

据实验认为温度在92℃－98℃是合适的，尤其在95℃为，这是因为：（1）这种温度未达沸腾，切片不容易脱离载玻片；（2）能够解离和破坏与蛋白交联的甲醛醛键等，处理时可以随意选择和确定抗原修复的作用时间。如果选择高压修复，因为温度较高，时间不宜过长

3.抗原修复时有效温度所需持续时间根据各单位的设备条件以及使用的仪器不同，抗原修复时在有效的温度范围内所持续的时间也不一样。

4.抗原修复液必须遵循自然降温规律，否则效果不好或达不到抗原修复的目的。

5.尽量使用足量的抗原修复液，防止切片干涸。

6.切片必须附贴牢固，否则发生掉片。

淋巴细胞抗原6B抗体保存条件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

避免反复冻融，保质期一年。

免疫荧光双重染色荧光双染或多重染色是指将带有不同荧光素标记的抗体孵育在同一张切片上，镜下观察时将不同的颜色组合在一起，将不同的抗原表达情况一起呈现出来，这样分析多个抗原的关联性更客观、更直接。

荧光双染也有直接法和间接法。直接法是使用带有不同荧光素标记的两个抗体同时孵育后观测；间接法需要用到两个不同种属来源的一抗（例如一个鼠源抗体，一个兔源抗体），后面要选择与一抗相对应的二抗同时需要带有不同的荧光素标记（例如FITC标记山羊抗小鼠和Cy3标记山羊抗兔），间接法需要同时兼顾一抗和二抗的种属关系，避免出现相互的交叉反应。