上海仁捷生物科技有限公司

金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒含量检测

时间:2017-7-20阅读:124
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金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本金属硫蛋白MT)的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包金属硫蛋白MT)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的金属硫蛋白MT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

8孔×12

8孔×6

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

*

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

操作步骤

  1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  3.   样本孔待测样本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验结果计算

所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程将样品的OD值代入方程,计算出样品浓度

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